血红素和伊红染色(Hematoxylin and eosin stain,简称H&E染色)是组织学中最主要的组织染色方法之一。这种染色技术随着时间的推移,在医学诊断中成为基准,特别是在病理学领域。当病理学家查看疑似癌症的活检样本时,他们往往会依赖于这种染色方法。
H&E染色由两种主要的染料组成:血红素和伊红。血红素主要是将细胞核染成紫蓝色,而伊红则将细胞质和细胞外基质染成粉红色,这使得病理学家能够轻易区分细胞的核与质。此外,染色后的颜色模式还能显示组织样本的结构布局和细胞的分布情况,从而提供关键的组织学资讯。
这种染色技术自1877年由俄罗斯喀山帝国大学的化学家尼古拉斯·维索茨基(Nicolaus Wissozky)首次引入以来,便以其便捷和有效而被广泛应用。
H&E染色程序之所以成为组织学的主要染色方法,是因为其操作快速且成本低,同时能够揭示大量的显微解剖特征。这种染色技术不仅能用于诊断多种组织病理状况,还能适应各种不同的实验室条件和组织固定剂的影响,这使其在实际应用中极具价值。
尽管H&E染色法具有广泛的应用性,但在某些复杂的情况下,可能需要使用更具特异性的染色方法来获得更清晰的对比度。
准备H&E染色的解析液有许多方法,且各实验室的染色流程可能有所不同。虽然并不存在统一的标准程序,但根据经验,细胞核通常会被染成蓝色,而细胞质和细胞外基质则呈现粉红色。这一标准化过程都能在不同的实验室中保持较高的一致性。
在取得组织样本后,通常会经过固定、脱水并嵌入熔化的石蜡中,接着再用微切刀将其切割成薄片。在这个过程中,样本会附着于显微镜载玻片,其石蜡部分会用溶剂去除,随后进行再水化,最终准备进行染色。
血红素染料主要使细胞的核呈现蓝色或深紫色,而伊红则染色细胞质及一些其他组织,形成多达五个不同的粉红色调。这使得病理学家在观察时能有效识别细胞的内部结构。值得注意的是,红血球会被染得非常鲜红,这使得它们在显微镜下容易辨认。
细胞核的染色原理在于血红素和金属盐(通常是铝盐)形成的染料金属复合体与DNA的结合。
虽然血红素的氧化形式血红素(hematein)是主要的颜色来源,但染色过程仍然是以血红素命名。这是因为,当血红素与金属盐结合时,它呈现出类似于阳性染料的特性,而伊红则是一种阴性和酸性染料。细胞核的染色主要是依赖于颜色复合体与DNA之间的结合。这一过程与使用一些阳性染料进行核染色的机制有所不同。
此外,样本中可能出现的黄褐色因内源性色素如黑色素所引起,而基底膜则需借助PAS染色或某些银染色来使其可以清楚显示。
在诊断过程中,H&E染色被广泛应用于不同组织的观察,包括肿瘤、炎症及其他病理状况。这不仅显示了这种染色法的重要性,也让专业人士在现实的医学场景中得以发挥其重要作用。
H&E的颜色分布和样本中结构的表现,提供了细胞学及组织学的重要视角。
随着数位病理学的发展,H&E染色不仅仍然是现场诊断的金标准,还在数据分析和图像处理方面展现出新的潜力。面对这样一个广泛应用的技术,其背后的科学机制仍然引发了许多问题,让我们不禁思考:未来这项技术又将如何在医学上继续演进并提供更精确的诊断?