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你知道嗎？為何蛋白質的顏色變化能揭示它的濃度？
蛋白質在各種生物過程中扮演著至關重要的角色，因此測量蛋白質的濃度對於許多生物醫學研究和實驗而言至關重要。然而，傳統的測量方法往往需用到特定的設備或複雜的步驟，使得很多研究者在進行蛋白質分析時面臨挑戰。為了解決這些問題，1976年，馬里奧‧M‧布拉德福德（Marion M. Bradford）發明了一種簡單而快速的測量蛋白質濃度的技術，稱為布拉德福德蛋白質測定法。
布拉德福德蛋白質測定法利用色變來確定蛋白質的濃度，這一過程主要是依賴於一種名為考馬斯亮藍G-250的染料。
根據布拉德福德法，當蛋白質溶液與考馬斯灰藍G-250染料結合時，染料顏色會發生變化，從原本的紅色轉變為藍色。這一變化的關鍵是因為染料在酸性環境中會與蛋白質中的某些氨基酸進行非共價鍵結合，進而改變其吸光度。具體來說，染料的吸收峰在465納米，當它與蛋白質結合後，吸收峰會移動至595納米。
這種吸收的變化可以被用來推算樣品中蛋白質的濃度。
這一方法不僅具有靈敏度高、操作簡單等優點，而且不容易受到其他化學物質（如鈉、鉀或某些糖類等）的影響。這在許多含有雜質的樣品中非常重要。然而，當樣品中的SDS濃度過高時，可能會干擾法測定的準確性，使得蛋白質的指量得不到正確引導。在面對這一挑戰時，研究者們不斷調整測量條件，探討替代的分析方法，以保持實驗的準確性。
布拉德福德蛋白質測定法的關鍵優勢在於它能夠在短短半小時內完成，不僅節省時間還降低了實驗成本。其標準程序極為簡便，只需將布拉德福德試劑與樣品混合，經過短暫的時間等待後，就可以直接進行光度計測量。此外，這一方法還適用於幾乎所有類型的蛋白質，特別是在需要量化微量蛋白質的情況下，其靈敏度極高，尤其對於低於20μg的樣品同樣可進行準確測定。
布拉德福德蛋白質測定法的敏感性以及簡便性，讓研究者能夠靈活採用它來完成各種蛋白質的分析工作。
隨著科學研究的進步，布拉德福德蛋白質測定法也面臨著一些挑戰。例如，測定範圍相對較短，通常要在0μg/mL和2000μg/mL之間進行測量，這就迫使研究者在分析樣品時進行稀釋，這可能會導致測量誤差。此外，布拉德福德法對於某些蛋白質的測量結果也會有所偏差，特別是在膠原蛋白含量較高的樣品中，這使得對該方法的改進成為未來的發展重點。
另一個值得注意的改進是在測定過程中，添加少量的十二烷基硫酸鈉（SDS）會顯著提高對膠原蛋白等關鍵蛋白質的檢測精確性。這一改進不僅可以提高對膠原類蛋白的檢測靈敏度，還可以減少對非膠原蛋白的吸收。
隨著這一領域的持續研究，布拉德福德蛋白質測定法的應用正越來越廣泛。不僅在生物學和生物醫學領域中得到廣泛使用，還進一步推動了對蛋白質及其功能的理解。這樣的技術不僅能加速蛋白質研究的進程，還能為新抗藥性的研發提供重要的基礎數據。蛋白質的顏色變化，又能為我們提供哪些曾經意想不到的線索呢？
