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얇은 층 크로마토 그래피 (TLC)는 비 휘발성 혼합물의 성분을 분리하기위한 크로마토 그래피 기술입니다.이 과정은 정적 위상으로 알려진 비 반응성 고체에 얇은 흡착제 물질을 적용함으로써 수행된다.샘플을 크로마토 그래피 플레이트에 적용한 다음 이동성 용매 또는 용매 혼합물로 용리시킨다.용매는 모세관 작용에 의해 위쪽으로 움직이고 정적 및 이동 단계에 대한 인력의 차이에 따라 구성 요소를 분리합니다.
얇은 층 크로마토 그래피는 빠르고 단순하며 상대적으로 저렴한 비용으로 높은 감도 결과를 제공합니다.
TLC 기술은 특히 반응 진행 상황을 모니터링하고, 혼합물에서 화합물을 식별하고, 순도를 결정하거나, 소량의 화합물의 정제를 수행하는 데 특히 적합합니다.TLC가 수행 될 때, 샘플은 일반적으로 스트립의 바닥 가장자리에 놓고 개발 챔버에서 용매와 접촉된다.다른 용출 조건 하에서, 화합물은 다른 속도로 이동하여 얇은 층 판에 별도의 반점을 형성한다.
박막 크로마토 그래피 공정
TLC의 작동 단계는 종이 크로마토 그래피와 유사하지만 달리기 속도가 빠르고 분리 효과가 향상됩니다.얇은 층 크로마토 그래피 플레이트를 실행하는 기본 프로세스에는 4 가지 주요 단계가 포함됩니다.
- 플레이트 준비 : 모세관 튜브를 사용하여 TLC 플레이트의 하단 가장자리에 소량의 농축 샘플 용액을 바릅니다.다음 단계로 진행하기 전에 솔벤트가 완전히 증발하십시오.
- 개발 실 준비 : 깊이가 1cm 미만인지 확인하기 위해 개발 용매를 분리 실에 넣고 여과지를 사용하여 용매 표면에 닿습니다.
- 개발 프로세스 : TLC 플레이트를이 컨테이너에 넣어 샘플 스팟이 이동 단계 내에 침수되지 않도록한 다음 용매 증발을 방지하기 위해 덮습니다.
- 시각화 : 솔벤트가 플레이트로부터 증발 한 후 다른 방법 (예 : UV 광 또는 염색)을 사용하여 블록을 관찰하십시오.
분리 원리
화합물의 분리는 정적 단계에 대한 인력의 차이와 용매에 대한 용해도의 차이에 의해 야기된다.각 화합물 및 이동상은 정적 위상의 결합 부위에서 경쟁하므로 다른 화합물은 다른 속도로 TLC 플레이트에서 이동합니다.이러한 차이는 더 나은 분리를 위해 다른 용매 또는 용매 혼합물을 사용하여 조정할 수 있습니다.
"다른 모바일 단계에서 얻은 분리 효과는 매우 다릅니다."
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표준 TLC에서 정적 위상은 실리콘과 같은 극성 물질입니다.더 많은 극성 화합물이 정적 위상과 더 강하게 상호 작용하여 움직임이 느려집니다.대조적으로, 역상 TLC는 C18 기능화 된 실리카 겔과 같은 비극성 정적 위상을 사용하고, 비극성 화합물은이 시점에서 천천히 이동하는 반면, 극성 화합물은 더 빠르게 위로 이동할 수있다.
용매 선택
적절한 이동 단계를 선택하는 것은 중요한 작업이며, 연구원들은 용매의 용해도 및 TLC의 장단점과 같은 다양한 고려 사항을 사용할 수 있습니다.일반적으로 사용되는 용매 혼합물은 에틸 아세테이트 및 헥산 (ETOAC/헥스) 및 메탄올 및 디클로로 메탄 (MEOH/DCM)을 포함한다.
분석 기술
많은 화학 물질이 무색이기 때문에 과학자들은 어둠에 크로마토 그래피 플레이트를 배치하여 특정 형광 화합물을 빛나게 만들거나 요오드 증기로 화합물을 간단히 염색하여 시각화하는 등 다양한 시각화 방법을 개발했습니다.
"얇은 층 크로마토 그래피는 반응 모니터링 및 순도 검사에서 중요한 기술입니다."
얇은 층 크로마토 그래피의 적용
얇은 층 크로마토 그래피는 반응 모니터링 및 분석에 널리 사용됩니다.반응의 진행 상황을 추정하는 빠르고 쉬운 방법을 제공합니다.다른 화합물로 비교 테스트를 통해 유사성인지 또는 동일한 물질인지 직접 결정할 수 있습니다.
또한, 얇은 층 크로마토 그래피는 또한 샘플 순도 및 소규모 정제의 검사에서 실용적이다.샘플의 순도를 감지 할 때, 한 지점 만 표시하는 것이 이상적이며, 여러 지점이 나타나면 순수한 물질이 아닌 혼합물 일 수 있습니다.
빠르고 효율적인 특성을 가진 얇은 층 크로마토 그래피는 기본 분석 도구 일뿐 만 아니라 약제 성분의 키랄 제어 또는 분리에 중요한 역할을하는 데 도움이됩니다.그렇다면이 무색 화합물 뒤에있는 이야기를 탐구 하시겠습니까?
