Georg Brehm

RNA dependent DNA polymerase in cells of xeroderma pigmentosum.

Abstract Cells from X.P. ∗ skin contain an RNA dependent DNA polymerase, while in cells from normal skin this enzyme is lacking. This finding stimulates the thought that carcinogenesis in X.P. cells is due to an infection with an oncogenic RNA virus.

Möglichkeiten zur gezielten Diagnose durch Bestimmung der sauren Desoxyribonucleasen im Urin gesunder Kontrollpersonen und Xeroderma pigmentosum-Patienten

SummaryThe distribution pattern of desoxyribonuclease (DNase) activity1 in the urine of healthy subjects and xeroderma pigmentosum (X.p.) patients has been examined by micro disc electrophoresis. When incubated at pH 5.0, four distinct bands of DNase activity are shown in normal urine. In urine of X.p. patients a significant decrease of the second to fourth band can be observed. The change of the third band is extremely obvious. Further to the influence of native DNA, denaturated DNA and EDTA on the pattern of DNase activities were studied. The decrease of DNase activity in X. p. urine is not due to the presence of an inhibitor but is rather caused by lower enzyme concentrations.ZusammenfassungDas Verteilungsmuster der DNase-Aktivität1 im Urin von Normalpersonen und X.p.-Patienten wurde mit einem mikro-disk-elektrophoretischen Verfahren untersucht. Bei saurer Inkubation sind 4 distinkte Aktivitätsbanden im Normalurin nachweisbar. Urin von X.p.-Patienten zeigt eine deutliche Verminderung der 2.–4. Bande, wobei die Veränderung der 3. Bande besonders auffällig ist. Es wurde ferner untersucht, wie sich das Verhalten verändert, wenn statt nativer DNA denaturierte als Substrat angeboten und wenn die zweiwertigen Ionen durch EDTA komplexiert wurden. Eine Aktivitätsverminderung ist nicht auf das Auftreten von Inhibitoren zurückzuführen, sondern wahrscheinlich durch eine Konzentrationsverminderung an Enzym verursacht.

Eiweichemische und immunologische Untersuchungen bei Hautkranken

I. Einleitung Schon die H u m o r a l p a t h o l o g i e der An t ike und des Mi t t e la l t e r s sowie die Krasen leh re R o k i t a n s k y s besch/~f~ig~en sich m i t den , ,KSrperss u n d d a m i t auch m i t den EiweiBen. Es bl ieb jedoch der m i t na tu rwissenschaf t l i chen Methoden a rbe i t enden Medizin der zwei ten Hs des X I X . u n d des X X . J a h r h u n d e r t s vorbeha l t en , die Er forschung der BluteiweiBe u n d ihrer B e d e u t u n g ffir die Phys io logie und Pa tho log ie des Menschen in Angr i f f zu nehmen. Al lerd ings wurde die En twick lung der EiweiBchemie lange Zei t durch die h ierbei vo rhandenen rae thod ischen Schwier igkei ten , mehr als bei der Un te r suchung andere r KSrper baus te ine , gehemmt . A u f de rma to log i schem Gebie t haben bere i ts 1900 TO1~OK u. VAs durch Essigs/~ure-Alkohoffs den EiweiBgehal t yon H a u t b ] a s e n be i versch iedenen K r a n k h e i t s b f l d e r n nn te r such t . F e r n e r b e s t i m m t e n K ~ I ~IC~ u. POLLACCD 1905 den G e s a m t p r o t e i n g e h a l t yon Blasen u n d Blur grobquan~i ta~iv durch r e f r ak tome t r i s che U n t e r s u c h u n g e n m i t dem Pu l f r i ch -Pho tomete r . 1925 ffihrte MnMMnSR~nWng Messungen der Viscos i ts der Oberf l s u n d der Schu tzwi rkung der Serumkol lo ide bei Gesunden u n d I Iau tkranken durch. Bis zum E n d e der dreiBiger J a h r e waren die B e s t i m m u n g e n des GesamteiweiBes u n d die des Albumins a n d der Globuline, ausgedr i i ck t als

Activity and kinetics of DNA dependent DNA and RNA polymerases in xeroderma pigmentosum and in normal human skin

Summary1.DNA dependent DNA polymerase (E.C.2.7.7.7) was prepared from human normal and from Xeroderma pigmentosum skin.2.DNA polymerase from normal skin has the same Michaelis constant with native and denatured DNA as templateKm= 120 ± 11 µg DNA/ml, with differing maximum reaction velocities.3.The enzyme from Xeroderma pigmentosum has the same Michaelis constant for denatured DNA as the enzyme from normal skin, but with native DNA as template, theKmvalue is lower (97.2 ± 9.8). The maximum reaction velocities of the Xeroderma pigmentosum enzyme with native resp. denatured DNA as template are the same.4.DNA dependent RNA polymerases (E.C.2.7.7.6) from normal and Xeroderma pigmentosum skin were found to be the same.5.Two alternatives to explain the findings are discussed. Either in the Xeroderma preparation an endonuclease with primer forming ability from native but not from denatured DNA is lacking in contrast to normal skin, or the enzyme preparations contain two DNA polymerases, one of them being diminished and/or altered in Xeroderma skin.Zusammenfassung1.DNA-abhängige DNA-Polymerase (E.C.2.7.7.7) wurde aus normaler menschlicher Haut und aus Haut von 2 Patienten, die an Xeroderma pigmentosum erkrankt waren, gewonnen.2.Die DNA-Polymerase aus normaler Haut hat sowohl mit nativer als auch mit denaturierter DNA als Template dieselbe Michaelis-KonstanteKm= 120 ± 11 µg DNA/ml, jedoch bei unterschiedlicher maximaler Reaktionsgeschwindigkeit.3.Das Enzym aus Xeroderma pigmentosum-Haut hat für denaturierte DNA dieselbe Michaelis-Konstante wie das aus normaler Haut. Mit nativer DNA als Template jedoch ist der Wert niedriger:Km= 97,2 ± 9,8. Dabei sind jedoch die maximalen Reaktionsgeschwindigkeiten für das Xeroderma-Enzym für native und denaturierte DNA die gleichen.4.Die DNA abhängige RNA-Polymerasen (E.C.2.7.7.6) normaler und von Xeroderma-Haut erwiesen sich als gleich.5.Zwei alternative Erklärungen für die Befunde werden diskutiert. Entweder fehlt in der Xeroderma-Präparation eine Endonuclease mit Primer-bildender Wirkung für native, aber nicht für denaturierte DNA im Gegensatz zu normaler Haut, oder die Enzympräparationen enthalten 2 DNA-Polymerasen, wovon bei Xeroderma eine vermindert und/oder geändert ist.

Quantitative Immunglobulinbestimmungen im Seminalplasma

ZusammenfassungEs wird über quantitative Immunglobulinbestimmungen im Seminalplasma berichtet.γG,γA undγM sind in unterschiedlicher Menge nachweisbar, wobei jedoch keine Abhängigkeit von den verschiedenen Spermaqualitäten besteht.SummaryQuantitative estimations of immunoglobulins in seminal plasma were performed.γG,γA andγM are present in various amounts, but there is no dependance in regard to the quality of semen.

Studies on the activity of deoxyribonuclease in skin from xeroderma pigmentosum patients

SummaryThe total activity of deoxyribonucleases (DNases) from Xeroderma pigmentosum (X.P.) and from normal skin at pH 7 is equal. Contrary to that the total activity of DNase from X.P. at pH 5.3 is significantly lower compared to that from normal skin.Discelectrophoretic investigations of the pattern of DNases have shown, that in crude extracts of skin from healthy persons four bands with acid DNase-activity exist. In extracts of X.P. skin from two patients only one resp. three bands can be found.The results are discussed in relation to the molecular defect in Xeroderma pigmentosum.ZusammenfassungDie Gesamtaktivität der neutralen Desoxyribonucleasen (DNasen) in Xeroderma pigmentosum (X.P.) — und in Normalhaut ist gleich. Dagegen ist die Gesamt-DNase-Aktivität bei pH 5,3 in X.P.-Haut im Vergleich zur Kontrollhaut signifikant geringer.Diskelektrophoretische Untersuchungen des Verteilungsmusters der DNasen haben gezeigt, daß in Rohextrakten aus Haut von Kontrollpersonen vier Banden mit saurer DNase-Aktivität vorhanden sind. In Extrakten aus X.P.-Haut von zwei Patienten sind nur eine bzw. drei Banden nachweisbar.Die Ergebnisse werden im Zusammenhang mit dem molekularbiologischen Defekt bei Xeroderma pigmentosum diskutiert.

Quantitative Bestimmungen von Dehydroepiandrosteron, Androsteron, Ätiocholanolon, Gesamtoestrogen und Testosteron im Plasma und Hauteluaten bei Acne vulgaris

SummaryIn male and female patients with acne vulgaris quantitative estimations of dehydroepiandrosterone, androsterone, aetiocholanolone and estrogens in blood plasma and skin eluats were performed. Additionally testosterone levels in skin eluats were determined.Estrogens in blood plasma were elevated in men, diminished in women. In skin eluats there was a fall of the testosterone/estrogens quotient in men and a rise in women. Dehydroepiandrosterone levels were diminished in both sexes.The quotient dehydroepiandrosterone/testosterone showed lowered values in women. After treatment of acne patients with dehydroepiandrosterone sulfate there resulted a normalisation of dehydroepiandrosterone levels in blood plasma in men and women, the quotient testosterone/estrogens rose in men and fell in women.ZusammenfassungBei acnekranken Männern und Frauen sowie bei einer Kontrollgruppe wurden Dehydroepiandrosteron, Androsteron, Ätiocholanolon und Oestrogene im Plasma und in Hauteluaten quantitativ bestimmt, im Hauteluat zusätzlich noch Testosteron.Die Oestrogene waren im Plasma bei acnekranken Männern erhöht, bei Frauen erniedrigt. Im Hauteluat war die Relation Testosteron/Oestrogene bei Männern erniedrigt, bei Frauen erhöht. Dehydroepiandrosteron war im Hauteluat sowohl bei Männern als auch bei Frauen erniedrigt. Der Quotient DHEA/T bei Frauen zeigte eine Verminderung zugunsten des Testosterons.Wurden die Acnepatienten mit Dehydroepiandrosteron-Sulfat behandelt, so kam es zu einer Normalisierung von Oestrogenen im Plasma bei Männern und Frauen, die Relation T/O stieg bei Männern an und fiel bei Frauen ab, im Sinne einer Angleichung an die Verhältnisse bei Normalpersonen.

ON THE PERMEATION OF BLOOD PROTEINS IN THE SKIN AND THEIR QUANITATIVE DETERMINATION IN A CANTHARIDES BLISTER MODEL

ZusammenfassungMittels chemischer und immunochemischer Methoden wurde vergleichend der Gehalt an Proteinen in Cantharidenblasen und Blutserum bestimmt. Erstmals werden auch quantitative Untersuchungen von Präalbumin, α2-M-Globulin, Coeruloplasmin, Haptoglobin und Transferrin im Cantharidenblaseninhalt vorgenommen. Dabei fanden sich statistisch gesicherte Unterschiede zwischen Cantharidenblasen- und Seruminhalt im Sinne tieferer Werte in den Blasen bei Gesamteiweiß, Präalbumin abs., α2-M-Globulin abs., α2-Globulin abs. und rel.-%, Coeruloplasmin abs., β-Globulin abs., Transferrin abs. und γ-Globulin abs. Albumin abs. und rel.-% wiesen signifikante Unterschiede in Richtung höherer Werte in den Cantharidenblasen auf. Das Makroglobulin α2-M-Globulin passierte vergleichsweise schwerer die Capillarschranke zwischen Blut und Blaseninhalt als die niedermolekularen Proteine Coeruloplasmin, Haptoglobin und Präalbumin.SummaryComparative studies on Protein contents of blood and Cantharidin blisters were performed by means of chemical and immunochemical methods. For the first time quantitative measurements of Praealbumin, α2-M-Globulin, Coeruloplasmin and Transferrin were done. Statistically significant differences between blister content and serum levels of proteins with higher values in the blisters were found in Total Protein, Praealbumin abs., α2-M-Globulin abs., α2-Globulin abs and rel.-%, Coeruloplasmin abs., β-Globulin abs., Transferrin abs and γ-Globulin abs. Only Albumin abs. and rel.-% showed higher values in blisters as compared with the serum levels. Praealbumin, Haptoglobin and Coeruloplasmin were found to pass the capillary membrane, as measured by the difference between serum and blisters fluid content, more easily than the macromolecular protein α2-M-Globulin.Mittels chemischer und immunochemischer Methoden wurde vergleichend der Gehalt an Proteinen in Cantharidenblasen und Blutserum bestimmt. Erstmals werden auch quantitative Untersuchungen von Praalbumin, α2-M-Globulin, Coeruloplasmin, Haptoglobin und Transferrin im Cantharidenblaseninhalt vorgenommen. Dabei fanden sich statistisch gesicherte Unterschiede zwischen Cantharidenblasen- und Seruminhalt im Sinne tieferer Werte in den Blasen bei Gesamteiweis, Praalbumin abs., α2-M-Globulin abs., α2-Globulin abs. und rel.-%, Coeruloplasmin abs., β-Globulin abs., Transferrin abs. und γ-Globulin abs. Albumin abs. und rel.-% wiesen signifikante Unterschiede in Richtung hoherer Werte in den Cantharidenblasen auf. Das Makroglobulin α2-M-Globulin passierte vergleichsweise schwerer die Capillarschranke zwischen Blut und Blaseninhalt als die niedermolekularen Proteine Coeruloplasmin, Haptoglobin und Praalbumin.

Verhalten von Immunglobin E bei ausgewählten Dermatosen

SummaryQuantitative estimations of IgE levels in blood serum of patients with selected skin diseases were performed and showed high levels in several cases of erythroderma, mycosis fungoides, bullous pemphigoid, lupus erythematodes, scleroderma and exanthemas due to penicillin or other drugs.In these cases asthma, rhinitis allergica or intestinal worm infections were excluded. Autoantibodies for instance against epidermis are discussed. Since by the Risa-Test only the sum of all IgE molecules present in a blood sample is estimated it is hoped that by using the Rast-test in the near future more will be learned about specific reaginic IgE. Yet before this can be done the specific antigens responsible for reagin production must be found.ZusammenfassungQuantitative Untersuchungen des IgE-Spiegels im Blut verschiedener Hautkranker zeigten eine auffallende Häufigkeit von hohen IgE-Werten bei so verschiedenartigen Erkrankungen wie Erythrodermie, endogenem Ekzem, Mycosis fungoides, Parapemphigus, Penicillinexantheme, Lupus erythematodes, Arzneimittelexanthem, Sklerodermie, die nicht durch Asthma, Heuschnupfen oder Wurmbefall zu erklären waren. Antikörper gegen körpereigene Substanzen werden diskutiert. Zu berücksichtigen ist, daß es sich beim Risa-Test um die Bestimmung der Gesamtsumme der IgE-Moleküle handelt. Wir stehen erst im Beginn der Erforschung der Reagine. Der Rast-Test wird in Zukunft hier weitere Klärung bringen, wobei jedoch als Voraussetzung hierfür die vorherige Kenntnis des schuldigen Antigens stehen muß.

Untersuchung der Wirkung von Antilymphocyten-Serum auf das experimentelle 2,4-DNCB-Ekzem beim Meerschweinchen

SummaryThe effect of antilymphocytic antiserum (ALS) on contact sensitivity was studied in guinea pigs during and after sensitization with DNCB.13, 16, 23 and 80 days after the first application of DNCB the degree of sensitisation was chequed by patch testing. Treatment with ALS during and after the course of DNCB-sensitization resulted in a significant suppression of contact sensitivity, whereas controls showed no effect.No difference was found after 80 days of DNCB-sensitivity and 50 days after the last injection of ALS.ZusammenfassungEs wurde die Wirkung eines heterologen Antilymphocyten-Serums (ALS) auf das experimentelle Kontaktekzem des Meerschweinchens, hervorgerufen durch Sensibilisierung mit 2,4-Dinitrochlorbenzol (DNCB), geprüft.3 Gruppen von Meerschweinchen wurden wie folgt untersucht:1.Nach der abgeschlossenen Sensibilisierungs-Behandlung mit ALS,2.Kontrollgruppe mit Normalserum behandelt,3.während der Sensibilisierungszeit Behandlung mit ALS. Am 13., 16., 23. und 80. Tage nach Sensibilisierungsbeginn wurde das Vorhandensein einer Sensibilisierung durch eine Auslösungsreaktion geprüft.Sowohl bei den während der Sensibilisierung behandelten Tieren, als auch bei denen, die nach der Sensibilisierung mit ALS behandelt wurden, war eine statistisch gesicherte Ekzemunterdrückung zu beobachten. 80 Tage nach Sensibilisierungsbeginn und rund 50 Tage nach der letzten ALS-Injektion ließ die Wirkung erheblich nach, so daß keine sicheren Unterschiede mehr zur Kontrollgruppe bestanden.Eine ekzemsuppressive Wirkung von Normalserum konnte nicht beobachtet werden.