Gisele Silva Boos

Utilização de biópsias da terceira pálpebra e mucosa retal em ovinos para diagnóstico de scrapie em uma propriedade da região sul do Brasil

Scrapie, a form of transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) is a fatal neurodegenerative disorder that affects sheep and goats. The disease is characterized by an accumulation of the abnormal prionic protein (PrPSc) in the encephalic and lymphoreticular tissues. This paper describes the use of anti-prionic protein immunohistochemical (IHC) procedure as a method of pre-clinical diagnosis of scrapie.The test was carried out in biopsied lymphoreticular tissues from third eyelid and rectal mucosa. Anti-prion protein monoclonal antibodies F89/160.1.5 and F99/97.6.1 were used. Scrapie diagnosis in lymphoreticular tissues through IHC was achieved when the samples had a minimum of three lymphoid follicles in well delimited germinal centre. Positive immunostaining was identified in 19 out of 318 samples of the third eyelid. Material sampled at post-mortem examination in 18 of these scrapie-positive sheep, which were previously verified by biopsy, and in 21 of its relatives, was confirmed with IHC tests. Positive immunostaining from rectal mucosa tissue was not observed. Third eyelid and tonsil were the organs with the larger amount of positive immunostaining (18/18 and 8/18 respectively) at post-mortem examination. None positive result was obtained along the 21 animals related to the positive ones, and none of the positive cases showed IHC labeling in the brain. The use of lymphoid tissues for scrapie diagnosis by IHC through biopsies showed to be a viable and efficient method for pre-clinical diagnostic.

Canine papillomatosis: a retrospective study of 24 cases (2001-2011) and immunohistochemical characterization

Foi realizado um estudo retrospectivo de 24 casos de papilomas em caes diagnosticados no periodo de janeiro 2001 a marco de 2011, bem como a sua caracterizacao imuno-histoquimica (IHQ). Caes sem raca definida foram os mais afetados, a idade media foi de 3,1 anos, com variacao de 6 meses a 10 anos e nao houve predilecao sexual. Quanto a localizacao das lesoes, 75,0% estavam na pele, 16,7% no labio e 8,3% em palpebra. Na avaliacao histologica havia proliferacao papilar exofitica do epitelio escamoso em 87,5% e papilar endofitica (invertido) em 12,5%. O tumor era caracterizado por hiperplasia do estrato espinhoso (87,5%) com coilocitos (70,8%) e inclusoes intranucleares basofilicas palidas (8,3%); o estrato granular estava proeminente com grande quantidade de grânulos de querato-hialina (95,8%); e havia hiperqueratose do estrato corneo (100%). Na avaliacao IHQ para Papillomavirus houve marcacao nos estratos granuloso e corneo em 83,3%. Estes achados indicam que os papilomas em caes sao causados por Papillomavirus, as lesoes epiteliais sao decorrentes do efeito citopatico viral, as particulas virais estao no nucleo das celulas e corpusculos de inclusao sao raros.

Surto de intoxicação por sal em suínos em Santa Catarina

A total of 70 pigs were affected and died due to salt poisoning in two farms in southern Brazil. The only source of drinking water available to the pigs was whey from cheese salting process. One day after receiving the whey, animals started getting sick and showed excessive salivation, opisthotonus, paddling, and cyclic tremors. At necropsy of three pigs, two of them presented flattening of gyri and the other one presented cortical telencephalon edema. Microscopically, severe diffuse neuronal necrosis in telencephalic laminar cortex, Alzheimer type II astrocytes (AIIA), eosinophilic and lymphocytic perivascular cuffing apart of perivascular edema were observed. Weak or absent anti-glial fibrillary acidic protein (GFAP) immunolabeling was associated with positive immunostaining for S-100 in AIIA cytoplasm. Concentration of sodium in serum and liquor samples from dead pigs resulted 140 and 156mmol/L, respectively.

Retrospective canine skin peripheral nerve sheath tumors data with emphasis on histologic, immunohistochemical and prognostic factors

Neste estudo retrospectivo foi determinada a frequencia dos tumores de bainha de nervo periferico (TBNP) na pele de caes diagnosticados pelo Setor de Patologia Veterinaria da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brasil, no periodo de 2000 a 2012. O historico dos caes, assim como a histologia, a imuno-histoquimica e o prognostico em relacao aos tumores foram baseados em 70 amostras histologicas, correspondendo a 40 femeas (57%), 29 machos (41%) e uma amostra sem a informacao do sexo. De 2000 a 2012, foram diagnosticados 2984 tumores de pele de caes pelo SPV-UFRGS, totalizando 2,34% das neoplasias em caes. A maior parte das amostras (43%) foi proveniente de animais sem raca definida (SRD), seguidos pelos da raca Pastor Alemao (10%). A localizacao predominante dos TBNP desta pesquisa ocorreu em membros (40% em membro toracico e 29% em membro pelvico), afetando principalmente caes de oito a 11 anos idade (54%). As amostras foram processadas rotineiramente para coloracao de Hematoxilina e eosina, e foram realizadas as coloracoes de azul de toluidina e tricromio de Masson, assim como realizada imuno-histoquimica (IHQ) anti-vimentina, -S-100, -GFAP, -actina, von Willbrand e neurofilamento. Os fatores anisocitose e anisocariose, indice mitotico, necrose intratumoral, invasao tumoral em tecidos adjacentes, localizacao tumoral, local de recorrencia e metastase foram relacionados com o diagnostico de benignidade (49/70) ou malignidade (21/70). O padrao histologico de Antoni A foi observado com mais frequencia em tumores benignos. A IHQ auxiliou no diagnostico dos TBNP, com maiores indices de imunomarcacao anti-vimentina e S-100. A analise estatistica das amostras de animais que apresentaram recidiva tumoral evidenciou que a chance de um animal com tumor de bainha de nervo periferico maligno desenvolver recidiva e 4,61 vezes maior do que em animais que apresentam tumor benigno.

Caracterização histológica e imuno-histoquímica das lesões de tuberculose em bovinos e de linfadenite granulomatosa em suínos

Mycobacterium sp. induz inflamacao granuloma-tosa em diferentes especies animais. Mycobacterium bovis e o complexo Mycobacterium avium sao importantes patogenos de bovinos e suinos e podem causar infeccao em humanos, principalmente imunossuprimidos. Perdas na producao, barreiras comerciais e prejuizos por condenacao de carcacas em abatedouro/frigorifico estao atrelados a ocorrencia dessas infeccoes, com prejuizos economicos significativos. Foi realizado um estudo de casos diagnosticados como tuberculose em bovinos e linfadenite granulomatosa em suinos no Setor de Patologia Veterinaria da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no periodo de janeiro de 2007 a dezembro de 2011. Dados referentes a raca, ao sexo, a idade e ao historico clinico foram compilados dos livros de registro e analisados. As caracteristicas histologicas das lesoes em linfonodos e pulmoes foram avaliadas em Hematoxilina-Eosina, com predominio de celulas gigantes nas lesoes de tuberculose bovina e de macrofagos epitelioides em suinos. As tecnicas histoquimicas de Ziehl-Neelsen e Tricromico de Masson foram utilizadas para evidenciar, respectivamente, bacilos alcool-acido resistentes e tecido conjuntivo fibroso nas lesoes. A tecnica de imuno-histoquimica foi utilizada em aproximadamente 30% dos casos estudados de cada especie, selecionados aleatoriamente, para a caracterizacao do infiltrado linfocitico. Foram utilizados os anticorpos anti-CD3 para a marcacao de linfocitos T e anti-CD79αcy para a marcacao de linfocitos B. Linfocitos T predominaram nas lesoes em ambas as especies, com diferenca estatisticamente significativa entre as medias dos linfocitos T e linfocitos B. Foi usado o teste t pareado, com t=5,501 (p<0,001) nas lesoes dos bovinos e t=5,826 (p<0,001) para as lesoes de linfadenite dos suinos. Adicionalmente foram marcados macrofagos com o uso do anticorpo anti-CD68 para bovinos e anti-Lisozima para suinos. Alem desses, o anticorpo policlonal anti-Mycobacterium tuberculosis foi utilizado para a deteccao de bacterias do genero Mycobacterium, com imunomarcacao positiva em todos os casos e, nos casos dos suinos, houve marcacao anti-Mycobacterium avium.

Scrapie diagnosis in a goat and four Santa Inês sheep from the same herd in Brazil

Scrapie is a fatal and progressive transmissible spongiform encephalopathy (TSE) of natural occurrence in sheep and goats. The suspicion of scrapie may be based on clinical signs; however, the detection of pathological features of the prionic protein (PrP) in target tissues is necessary to diagnose the disease. The presence of an abnormal protein form (PrPSc) in lymphoreticular and nervous tissues is an important characteristic in diagnosis. This paper reports a case of scrapie in a flock of 55 Suffolk crossbred sheep, 19 Santa Ines sheep and 21 goats in the Mato Grosso state, midwestern Brazil. The animals were euthanized after the confirmation of a scrapie case with clinical signs in a Suffolk sheep in the same farm. Samples of brainstem at the level of the obex and lymphoid issues like palatine tonsils, mesenteric lymph nodes, third eyelid fixed in formalin 10% were processed for histological examination. Histological examination with hematoxylin and eosin did not show any microscopic changes in samples. Immunohistochemistry (IHC) examination to detect anti-prion PrPSc was performed in lymphoid tissues. Scrapie diagnosis was confirmed based on IHC positive results for PrPSc in lymphoid tissues of a crossbreed goat and four Santa Ines sheep, without any clinical scrapie signs. IHC showed positive staining in at least three lymphoid germinal centers in goat mesenteric lymph node, palatine tonsil, and third eyelid samples. The mesenteric lymph node, and tonsil samples of all sheep showed positive immunostaining, and only one sheep showed positive staining in lymphoid follicles in the third eyelid. Scrapie diagnosis using IHC in fixed samples of lymphoreticular tissue is technically feasible to detect the disease in both goats and sheep, as a form of pre-clinical diagnosis. The results indicate that the herd was infected by a sheep coming from another herd where scrapie had been diagnosed before.