Héctor Fernando Gauna

Chronic Stress Effects on Adrenal Cortex Cellular Proliferation in Pregnant Rats

El estres cronico por inmovilizacion durante la gestacion puede provocar alteraciones de los mecanismos que mantienen la homeostasis en la glandula adrenal. El objetivo de este trabajo fue cuantificar el indice de proliferacion en la corteza adrenal durante la segunda mitad de la gestacion y comprobar los efectos que produce el estres cronico sobre el mismo. El indice de proliferacion en la corteza adrenal de ratas estresadas presento una disminucion significativa a los 12 y 17 dias de gestacion, mientras que en el dia 21 no presento modificaciones con respecto a sus controles. Por otro lado, el indice de proliferacion de la zona reticular en ratas controles y experimentales, presento una disminucion significativa con respecto a las zonas glomerular y fascicular de la corteza adrenal en los tres dias de la gestacion estudiados. Se puede concluir que el estres cronico por inmovilizacion produce disminucion del indice de proliferacion celular a los 12 y 17 dias de la gestacion que podria estar en relacion con las variaciones de las concentraciones plasmaticas de corticosterona, prolactina, y con la disminucion de factores de crecimiento especificos. Asimismo, la disminucion de la proliferacion en la zona reticular en relacion con las otras zonas corticales estaria en concordancia con la teoria de la migracion celular adrenal.

Maternal Chronic Stress Induces Premature Telencephalic Vesicles Development

La exposicion a diferentes estresantes fisicos y/o psicologicos causa dano cerebral, que se manifiesta en alteraciones comportamentales minimas hasta diferentes grados de neurodegeneracion, y que implican la sobreproduccion de compuestos nitrosativos-oxidativos, apoptosis y proliferacion celular. En el presente trabajo hemos analizado el efecto del estres cronico por inmovilizacion, sobre el desarrollo embriologico del cerebro anterior en fetos de ratas prenadas. El analisis morfometrico estereologico demostro que en los fetos de 12 dias de gestacion de madres estresadas muestran un aumento del tamano de la vesicula telencefalica. El perimetro y el espesor del cerebro anterior demostraron diferencias significativas en relacion a los controles de la misma edad gestacional, pero, no fue asi con su forma. Este efecto provocado por el estres cronico se podria considerar reversible en los estadios gestacionales subsecuentes. Es el primer trabajo que demuestra una considerable aceleracion del desarrollo del sistema nervioso central inducido por el estres gestacional. Nuestro modelo provee una nueva herramienta para los estudios de los efectos del estres durante el desarrollo embriologico

Adrenal response of male rats exposed to prenatal stress and early postnatal stimulation

Abstract Stress in pregnant rats caused by chronic immobilization alters the pattern of secretion of corticosterone and modifies the hypothalamic-pituitary-adrenal axis (HPA) of the fetus. Early postnatal handling, however, may reverse the effects of increased secretion of corticosterone. We investigated the effects of prenatal stress and postnatal handling on the activity of the HPA axis of male offspring of stressed female rats. Male 90-day-old rats from four groups were investigated: prenatally stressed animals without postnatal handling, prenatally stressed animals with postnatal handling, unstressed control animals with postnatal handling, and unstressed control animals without postnatal handling. After sacrifice, the adrenal glands were weighed to determine the adrenal-somatic index. Apoptosis was evaluated by TUNEL assay and active caspase-3 expression. We found that the adrenal gland cortex:medulla ratio increased in animals with prenatal stress and that eventually the stress caused apoptosis. Handling newborns to simulate maternal activity ameliorated some of the negative effects of prenatal stress.

Chronic stress and its effects on adrenal cortex apoptosis in pregnant rats

Abstract The model of chronic intermittent stress by immobilization during pregnancy may produce alterations in the mechanisms that maintain adrenal gland homeostasis. In earlier investigations using this model, significant variations in plasma prolactin and corticosterone levels, and adrenal gland weights were observed. We hypothesized that chronic stress causes changes in apoptosis in the adrenal glands of pregnant rats. We identified and quantified apoptotic cells in the adrenal cortex and examined their ultrastructural characteristics using transmission electron microscopy. Adrenal glands of pregnant rats at gestation days 12, 17 and 21 were studied for control and experimental (stressed) rats. Immunolabelling techniques, stereological analysis and image quantification of adrenal gland sections were combined to determine differences in apoptosis in the different cell populations of the adrenal cortex. The apoptotic index of the experimental rats showed a significant reduction at gestation day 17, while at days 12 and 21 there were no differences from controls. Moreover, the apoptotic index of the reticular zones in control and experimental animals showed a significant increase compared to the glomerular and fascicular zones at the three gestation times studied. Chronic stress by immobilization reduced the caspase-dependent apoptotic index at gestation day 17, which may be related to variations in plasma concentrations of estrogens and prolactin.

Chronic Stress Effects on NPY Neuronal Population During Rat Development

El proposito del presente estudio fue determinar los efectos del estres cronico en la poblacion de neuronas NPY encefalicas durante el desarrollo del S.N.C. fetal mediante tecnicas inmunocitoquimicas. Se demostro que las neuronas NPY presentan un morfologia similar en los dias de gestacion estudiados, pero su distribucion varia en el cerebro anterior, medio y posterior. Se comprobaron diferencias altamente significativas entre el cerebro anterior, medio y posterior (p<0,01) de fetos estresados (FE), variando dicha significacion dependiendo del dia de la gestacion y del area estudiada. En los diferentes nucleos cerebrales del cerebro anterior se detectaron aumentos en ARC (Arcuate Hypothalamic Nucleus), PH (Posterior Hypothalamic Area) de 17 dias y DM (Dorsomedia L Hypothalamic Nucleus) y en ARC (Arcuate Hypothalamic Nucleus) de 19dias (p<0,01) de F.E. En el cerebro medio se detectaron aumentos en DR (Dorsal Raphe Nucleus) (p<0,01) y PN (Pontine Nucleus) (p<0,05) de 19 F.E. En el cerebro posterior se detectaron aumentos en PnO (Pontine Reticular Nu, Oral Part) y RITg (Reticulotegmental Nu of the Pons) de 17 F. E. y Pyx, (Pyramidal Decussation), Rob (Raphe Obscurus Nucleus) y RPA (Raphe Pallidus Nucleus) de 19 F.E. Asimismo se comprobaron aumentos (p<0,05) en DPGI (Dorsal Paragigantocellular Nu.) de 17 F.E, CGPn (Central Gray of Pons) y PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus), de 19 F.E. Finalmente, no se comprobaron diferencias entre F. C. (fetos controles) y F. E. en los siguientes nucleos del cerebro anterior: AH (Anterior Hypothalamic Nucleus), DM (Dorsomedia L Hypothalamic Nucleus), de 17 dias; y EM, (Median Eminence), VMH (Ventromedial Hypothalamic Nucleus) de 19 dias. En el cerebro medio CG, (Central Periaqueductal Gray), DR (Dorsal Raphe Nucleus) de 17 dias. En el cerebro posterior el PnC, (Pontine Reticular Nu, Caudal Part), PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus), RMgG (Raphe Magnus Nucleus), IO (Inferior Olive) de 17 dias del cerebro posterior. El incremento del numero de neuronas NPY en todos los periodos estudiados en ratas estresadas, podria indicar la participacion del sistema NPY en la regulacion del eje adrenal hipotalamo - hipofisis.

IL-2 is involved in immune response of prenatally stressed rats exposed to postnatally stimulation

espanolRESUMEN: Las condiciones ambientales influyen en el crecimiento y desarrollo de los mamiferos durante la vida prenatal, posnatal temprana y pueden ejercer efectos a largo plazo en la vida adulta. Altas concentraciones circulantes de glucocorticoides durante el embarazo (estres prenatal) afecta a la actividad del eje hipotalamo-pituitario-adrenal (HPA) de la descendencia y se encuentra en relacion con alteraciones de las respuestas del sistema inmunologico. La estimulacion postnatal temprana de los animales estresados prenatalmente genera efectos beneficiosos a largo plazo en la reactividad del eje HPA y en la funcion del sistema inmunologico. El objetivo del estudio fue investigar el efecto de las manipulaciones posnatales tempranas sobre la respuesta inmune de ratas machos y dilucidar la posible relacion con la actividad del eje HPA. Crias controles y estresadas prenatalmente (PS) por inmovilizacion (IMO) se manipularon durante la primera semana de vida. Los animales controles y PS fueron sometidos a estres agudo por la IMO. Los niveles de corticosterona (COR) plasmatica se midieron por el ensayo de RIA, la proliferacion de linfocitos T por [3H] timidina y los niveles de IL-2 por la tecnica de ELISA directa. El estres prenatal cronico por IMO aumento los niveles plasmaticos basales de COR en la madre, mientras que las crias PS sometidas a una sesion de estres agudo posnatal mostraron disminuida la proliferacion de celulas T y niveles menores de IL-2. En conclusion, las estimulaciones postnatales tempranas revirtieron los efectos negativos provocados por el estres prenatal sobre la proliferacion de los linfocitos T y la liberacion de IL-2. EnglishABSTRACT: Environmental cues influence growth and development of mammals during prenatal and particularly early postnatal life and can exert long-lasting effects in adult life. High circulating concentration of glucocorticoids during pregnancy (prenatal stress) affects the activity of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis (HPA) of offspring and has been linked to alter immune system responses. Early postnatal stimulation (handling) of prenatally stressed animals generates long-term beneficial effects on the reactiveness of the HPA axis and immune system function. The aim of this study was to further investigate the effect of handling on immune response in prenatally stressed male rats and to elucidate a possible relationship with the HPA axis activity. Control and prenatally stressed (PS) offspring by immobilization (IMO) were handled during the first week of life. Animals from both treatments were subjected to acute stress by IMO. Corticosterone (COR) plasma concentration was measured by RIA assay, T lymphocyte proliferation by [3H] thymidine assay and IL-2 levels by direct ELISA technique. Chronic IMO prenatal stress caused an increase in mother plasma COR basal levels. Furthermore, prenatally stressed rats subjected to an acute stress session had lower T cell proliferation and decreased IL-2 release. In addition, early postnatal stimulation reversed the negative effects of prenatal stress on proliferation of T lymphocytes and IL-2 release.

The effect of chronic stress on prenatal development of the central nervous system

Abstract The survival of developing embryos depends on the control and maintenance of homeostasis. Stress caused by chronic immobilization during pregnancy in rats may alter the normal development of the nervous system and increase susceptibility to psychiatric disorders. We investigated the effects of chronic stress on cell proliferation in the forebrains of embryos at 12 days of gestation, and in the hippocampus, dentate gyrus and cortex in embryos at 17 and 21 days of gestation. We examined serial sections of the embryonic brains of control and stressed rats at days 12, 17 and 21 of gestation. Brain sections were immunolabeled with anti-PCNA and stereological analysis was performed on 540 images. The results showed no statistical differences on days 12 and 17 of gestation in the proliferation area of the structures studied, whereas on day 21 of gestation, proliferation decreased in the cortex and dentate gyrus of embryos of the stressed group. These changes were related to decreased prolactin and increased corticosterone concentrations in the plasma.

Relative Concentrations of Placental Lactogen II and PRL-Like Protein-A in Stressed Rats Placenta

El estres cronico induce adaptaciones funcionales en los ejes hipotalamo-pituitario-adrenal (UPA) y en el simpatico medulo adrenal (SAM). Ambos ejes son considerados reguladores vitales de la homeostasis en los vertebrados (Seyle, 1936; Ostrandrerei al., 2006). Por otro lado, el desarrollo y crecimiento fetal de los mamiferos dependen en gran medida del buen funcionamiento de la placenta (Soares, 1991). Nosotros hipotetizamos que el estres cronico por inmovilizacion (IMO) aplicado a las ratas gestantes produce alteraciones en las concentraciones de las prolactinas en el tejido placentario y cambios en la respuesta del eje SAM. Se le aplico estres cronico por IMO a las hembras en los dias 12, 17 y 21 de la prenez y se analizo por inmunocitoquimica e inmunoblotting la localizacion y concentraciones del lactogeno placentario dos (PL-II) y la proteina A ligada a la prolactina (PLP-A) en la placenta. Se analizaron por HPLC, en las orinas de ratas prenadas (6,12,17,21 dias), los niveles del metabolito de las catecolaminas, (acido 3-metoxi 4-hidroximandelico) (VMA), a fin de determinar la respuesta del eje SAM al tratamiento. El estres cronico no indujo cambios tanto en la localizacion como en las concentraciones de PL-II y PLP-A en las placentas en los dias de la prenez estudiados. Los valores de VMA en las orinas de las madres estresadas se incrementaron en el dia 6 con respecto al control del mismo tiempo de prenez. Mientras que a los 21 dias los valores de VMA de las ratas estresadas son menores que los controles respectivos. Concluimos que en las madres estresadas cronicamente, no se alteraron las concentraciones de ambas prolactinas placentarias. En cambio se activo el eje SAM al comienzo de la prenez ante el primer estimulo estresante y luego una reduccion de la respuesta del eje ante el estres cronico, a medida que avanza la prenez