Heni Susilowati

Nitric oxide production by murine spleen cells stimulated with lipopolysaccharide from Actinobacillus actinomycetemcomitans

The aim of this study was to determine whether Actinobacillus actinomycetemcomitans lipopolysaccharide (LPS-A. actinomycetemcomitans) could induce murine spleen cells to produce nitric oxide (NO). Spleen cells derived from Balb/c mice were stimulated with LPS-A. actinomycetemcomitans or LPS from Escherichia coli for 4 days. The effects of N(G)-monomethyl-L-arginine (NMMA), polymyxin B, and cytokines (IFN-gamma and IL-4) on the production of NO were also assessed. The NO production from the carrageenan-treated spleen cells stimulated with LPS-A. actinomycetemcomitans or both LPS-A. actinomycetemcomitans and IFN-gamma was determined. The carrageenan-treated mice were transferred with splenic macrophages and the NO production was assessed from the spleen cells stimulated with LPS-A. actinomycetemcomitans or LPS-A. actinomycetemcomitans and IFN-gamma. The results showed that NO production was detectable in the cultures of spleen cells stimulated with LPS-A. actinomycetemcomitans in a dose-dependent fashion, but was lower than in the cells stimulated with LPS from E. coli. The NO production was blocked by NMMA and polymyxin B. IFN-gamma up-regulated but IL-4 suppressed the production of NO by the spleen cells stimulated with LPS-A. actinomycetemcomitans. The carrageenan-treated spleen cells failed to produce NO after stimulation with LPS-A. actinomycetemcomitans or both LPS-A. actinomycetemcomitans and IFN-gamma. Adoptive transfer of splenic macrophages to the carrageenan-treated mice could restore the ability of the spleen cells to produce NO. The results of the present study suggest that LPS-A. actinomycetemcomitans under the regulatory control of cytokines induces murine spleen cells to produce NO and that splenic macrophages are the cellular source of the NO production. Therefore, these results may support the view that NO production by LPS-A. actinomycetemcomitans-stimulated macrophages may play a role in the course of periodontal diseases.

VIABILITAS SEL EPITEL RONGGA MULUT (KB CELL LINE)YANG DIPAPAR EKSTRAK ETANOL KOPI

Latar belakang: Kafein merupakan zat yang terkandung dalam kopi, teh, coklat, dan minuman bersoda. Zat dengan struktur kimia 1, 3, 7- trimethylxanthine ini merupakan derivat yang dikonsumsi hampir oleh seluruh masyarakat di seluruh dunia. Kandungan terbanyak kafein terdapat pada kopi. Penelitianterdahulu melaporkan adanya apoptosis pada osteoblas setelah dipapar kafein. Mengingat tingginya konsumsi kopi di dunia yang mengalami peningkatan 1,2 % per tahun sejak tahun 1980 hingga lebih dari 2 % pada tahun 2010, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efek kafein pada epitel rongga mulut yang berkontak langsung dengan kafein. Pada penelitian ini digunakan sel KB sebagai model epitel oral. Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis respon sel epitel rongga mulut terhadap paparan ekstrak etanol kopi ditinjau dari viabilitas sel KB. Metode: Sel KB (2 x 104 sel) dikultur dalam DMEM pada microplate 96 well overnight sebelum perlakuan. Sel selanjutnya dipapar dengan ekstrak etanol kopi dalam berbagai konsentrasi (50 Ig/ml, 100 Ig/ml, 200 Ig/ml, 400 Ig/ml, 800 Ig/ ml) dan diinkubasi selama 24 jam dalam medium tanpa antibiotik. Sitotoksisitas diukur dengan menggunakan metode MTT assay. Data berupa nilai-nilai densitas optik dianalisis dengan Anava satu jalur Hasil: Analisis varian satu jalur terhadap nilai-nilai densitas optik pada MTT assay menunjukkan perbedaan bermakna pada p<0,05. Hal ini mengindikasikan bahwa ekstrak etanol kopi mampu menurunkan viabilitas sel KB setelah dipapar selama 24 jam. Analisis LSD juga menunjukkan perbedaan antara semua kelompok perlakuan, yang artinya semakin tinggi konsentrasi semakin rendah viabilitas sel KB yang terpapar. Kesimpulan: Ekstrak etanol kopi menyebabkan kematian sel KB. Diperlukan studi lebih lanjut untuk mengklarifkasi tipe kerusakan sel yang diakibatkan oleh kafein. Kata kunci: kafein, sel KB, viabilitas sel