Ikuzo Kamoi

Purification and Properties of Rice Bran Phospholipase C

米糠中に存在するホスホリパーゼCを疎水性アフィニティおよびイオン交換クロマトグラフィー等により精製し,その性状を明らかにした.(1) 米糠ホスホリパーゼCをn-デシルアミン・セファロース4Bゲルおよび各種クロマトグラフィーにより精製を行った結果,その比活性は抽出液に比べ357倍に上昇した.(2) ホスホリパーゼCの分子量は約160000,等電点はpH 4.3であった.(3) ホスホリパーゼCの性状は至適pH 9.5～10.0,最適温度約70℃を示し,活性はpH 7.0～11.0および70℃以下で安定であった.(4) ホスホリパーゼC活性に対する各種試薬の影響を調べた結果,Co2+によって賦活され,Cd2+およびEDTAによって強く阻害された.なお,EDTA処理を行った酵素はCo2+の添加により著しい活性回復を示し,Co2+が活性中心に関与していることが示唆された.(5) ホスホリパーゼCについてp-ニトロフェニルホスホリルコリンを基質とした場合のKm値およびVmaxをLINEWEAVER-BURKのプロットより求めた結果,それぞれ15.3×10-3Mおよび4.6×10-5M/min・mgであった.

Effects of Change in Sulphydryl Groups Concentration on the Heat-induced Gelation of Actomyosin after Pressure Treatment

加圧処理後のアクトミオシンの加熱ゲル形成に与えるSH基量の影響を知るため,塩濃度(0.1～1.0M KCl),加圧量(50～150MPa),加圧時間(5～120min)を変えてSH基量の測定を行なった.また,SH基ブロック剤であるN-Ethylmaleimide (NEM,2～16mM)の添加の影響,Sephacryl S-500による加圧処理後のアクトミオシンの分子量変化についても検討した.その結果,加圧処理を行なったアクトミオシンは,無加圧のものよりも(0.1～1,0M)KCl濃度において常に高いSH基量を示し,特に,加圧区の0.1M KClにおいてSH基量は急激に増加した.加圧量の影響は,0.25M KClにおいては100MPaから,0.70M KClでは50MPaからSH基量が増加していた.加圧処理時間の影響は,0.25M KCl,0.70M KCl共に,150MPa,10分の加圧でSE基量はほぼ最高値に達し,それ以上の加圧を行なってもほとんどSH基量の増加はみられなかった.NEM添加試験においては,0.25M KClでは4mMまでのNEM添加でワークダン値は減少し,明かな加熱ゲル形成の阻害が認められた.しかし,0.70M KClにおいては16mM NEMを添加しても加圧区,無加圧区共にワークダン値にはほとんど変化がみられず,加熱ゲル形成へのNEMの阻害は高塩濃度側では認められなかった.また,Sephacryl S-500によるゲル〓過では,加圧処理を行なったアクトミオシンの見かけ上の分子量は約270kダルトン無加圧のものより小さくなっていた.

The Effect ofα-Lactalbumin and β-Lactoglobulin on the Texturization of Rennet Casein

The effect of the addition of α-lactalbumin and β-lactoglobulin fractionated from whey protein isolate (WPI) on the texturization of rennet casein was investigated. Each whey protein component was added to rennet casein at a level of 5% on a dry basis. Surface hydrophobicity of each textured casein product was determined by using 1-anilino-8-naphthalene-sulfonate (ANS) and hydrophobic gel chromatography. An addition of β-lactoglobulin was found to be effective on decreasing the hydrophobicity of the resultant textured product, whereas α-lactalbumin was not. A decrease of the hydrophobicity, which was shown when β-lactoglobulin was added, was possibly associated with the formation of β-lactoglobulin-casein complex during cooking. The fibrousness of the product blended with β-lactoglobulin was superior to that containing α-lactalbumin. It was indicated that β-lactoglobulin contained in WPI played a major role in improving the fibrousness of the resultant textured product.

Studies on utilization of vitamin B1 in rice bran. (I). Accumulation of thiamin from rice bran by baker's yeast.

脱脂米糠中に含有されるチアミンをパン酵母に集積させることによって効率よく濃縮する方法について検討し, 以下の知見を得た。1) 米糠抽出液中から酵母へのチアミンの集積における至適pHは4.5～5.0, 至適温度は37～40℃であり, 酵母は米糠抽出液中に含有されるショ糖等をエネルギー源としてチアミン塩酸塩水溶液からの集積と同様に, 能動輸送により, チアミンを集積する。2) 米糠抽出液から酵母への一定時間後のチアミンの集積量はチアミン塩酸塩水溶液からのそれよりも少ない。しかし米糠抽出液中に共存する諸成分には, 集積に際して阻害効果をもつもののみでなく, 促進効果をもつものもあり, 複合的に上記の能動輸送を修飾しているものと考えられる。3) 米糠抽出液中から酵母へのチアミンの集積は, 糖を含む緩衝液中で酵母を前培養すること, および/または米糠抽出液をあらかじめ加熱することにより, 増大させることができた。