José Caamaño

Single nucleotide polymorphisms in ABCG5 and ABCG8 genes in Chilean subjects with polygenic hypercholesterolemia and controls.

Abstract Background: The excretion of cholesterol from liver and intestine is regulated by ATP-binding cassette half-transporters ABCG5 and ABCG8. Polymorphisms in their genes have been related to higher levels of plasma lipids. Thus, the aim of the present study was to evaluate the possible association between the 1950C>G (ABCG5) and the 251A>G (ABCG8) polymorphisms and the presence of hypercholesterolemia (HC) in Chilean subjects. Methods: A total of 118 non-related individuals with HC (total cholesterol, TC ≥6.2 mmol/L) and 104 normolipidemic subjects (controls, TC ≤5.17 mmol/L), aged 18 to 65 years old, were included in this study. The ABCG5 1950C>G and ABCG8 251A>G genotypes were assessed by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. Results: The genotype distribution of the ABCG5/ABCG8 polymorphisms was in Hardy-Weinberg equilibrium in both groups. The frequency of CC homozygous genotype for ABCG5 1950C>G polymorphism was higher in HC patients than in controls (42% vs. 10%, p<0.001). On the other hand, no significant differences for the 251A>G polymorphism of the ABCG8 gene were observed (p=NS). Nevertheless, HC subjects carrying the GG genotype for the 251A>G variant exhibited higher values of high-density lipoprotein cholesterol when compared to other genotypes (p=0.020). Conclusions: Our data showed that the ABCG5 1950C>G polymorphism is associated with HC in the studied population. Nevertheless, this study is limited by its sample size. Clin Chem Lab Med 2008;46:1581–5.

Frequency and Specificity of Red Blood Cell Alloimmunization in Chilean Transfused Patients

Background: Alloimmunization is an adverse effect of blood transfusions. In Chile, alloimmunization frequency is not established, and for this reason the aim of this study was to investigate the prevalence and specificity of red blood cell (RBC) alloantibodies in Chilean transfused subjects. Methods: Records from 4,716 multi-transfused patients were analyzed. In these patients, antibody screening was carried out prior to cross-matching with a commercially available two-cell panel by the microcolum gel test, and samples with a positive screen were analyzed for the specificity of the alloantibody with a 16-cell identification panel. Results: The incidence of RBC alloimmunization in transfused patients was 1.02% (48/4,716) with a higher prevalence in women (40/48). We detected 52 antibodies, the most frequent specificities identified were anti-E (30.8%), anti-K (26.9%), anti-D (7.7%), and anti-Fya (5.8%). The highest incidence of alloantibodies was observed in cancer and gastroenterology patients. Conclusion: The data demonstrated a low alloimmunization frequency in Chilean transfused patients, principally associated with antibodies anti-E, anti-K, anti-D, and anti-Fya.

Factor XII 46C --> T gene polymorphism in Chilean subjects with coronary artery disease and controls.

Objective: To investigate the possible association between factor XII (F12) gene variant and the presence of coronary artery disease (CAD) in Chilean subjects. Methods: A total of 112 unrelated patients with a diagnosis of CAD confirmed by angiography (33–74 years old) and 107 healthy controls (30–68 years old) were included in this study. PCR-RFLP was used to evaluate the 46C → T polymorphism of the F12 gene. Results: The genotype distribution for the 46C → T variant of the F12 gene in CAD patients (CC: 41%, CT: 39%, TT: 20%) and controls (CC: 38%, CT: 48%, TT: 14%) was comparable (p = 0.365). Similarly, the allelic frequency was equivalent (p = 0.833). The odds ratio for CAD associated with the mutated 46T allele was 1.06 (95% CI = 0.72–1.56) confirming the absence of an association. Conclusion: This study showed that the F12 46C → T gene polymorphism is not related to CAD in the studied population. However, this study is limited by its sample size and the use of controls not matched by age and sex.

TP53 Codon 72 Polymorphism Is Associated with Coronary Artery Disease in Chilean Subjects

Objective: To investigate the possible association between the codon 72 polymorphism (Pro72Arg, rs1042522) of the tumor suppressor gene (TP53) and the presence of coronary artery disease (CAD) in Chilean subjects. Subjects andMethods: A total of 209 unrelated patients with a diagnosis of CAD confirmed by angiography (33–74 years old) and 216 healthy controls (30–68 years old) were included in this study. The Pro72Arg polymorphism of the TP53 gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution for the Pro72Arg variant of the TP53 gene in CAD patients (PP: n = 13, 6.2%; PR: n = 61, 29.4%; RR: n = 135, 64.6%) and controls (PP: n = 18, 8.3%; PR: n = 94, 43.5%; RR: n = 104, 48.1%) was significantly different (p = 0.003). Similarly, the allelic frequency was also different (p = 0.003). The odds ratio for CAD related to the 72Arg allele was 2.0 (95% CI = 1.33–2.90), confirming the presence of an association. Conclusion: These findings suggest that the Pro72Arg polymorphism of the TP53 gene is associated with CAD in Chilean individuals.

Asociación del polimorfismo rs2241766 del gen de la adiponectina y enfermedad arterial coronaria en individuos del sur de Chile

La adiponectina, hormona peptidica secretada por los adipocitos, actua inhibiendo la formacion de la placa ateromatosa en casi todas sus etapas, ya sea modulando la respuesta inflamatoria, inhibiendo la expresion de moleculas de adhesion, la activacion de monocitos, la formacion de celulas espumosas y la migracion y proliferacion de celulas de musculo liso. En el presente estudio, fue evaluada la frecuencia del polimorfismo 45TMJ (rs2241766) del gen que codifica para la hormona adiponectina (ADIPOQ), junto con su posible contribucion al desarrollo de enfermedad coronaria en individuos del sur de Chile. Metodos: Fueron evaluados 416 individuos adultos (30 a 68 anos); 200 casos confirmados por angiografia y 216 controles. La genotipificacion del polimorfismo 451>G del gen ADIPOQ se realizo mediante la tecnica de PCR-RFLP. Resultados: El analisis de los resultados demuestra que la presencia del alelo G del polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ duplica el riesgo de padecer enfermedad coronaria en la poblacion estudiada (OR= 2.06; I.C.95%: 1.36-3.14). Conclusion: Nuestros datos revelaron la existencia de una interesante asociacion entre el polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ y enfermedad arterial coronaria en los sujetos analizados. Es importante destacar, que este hallazgo constituye el primer antecedente en poblacion chilena.

La Respuesta Terapéutica a Ezetimiba en Ratones C57BL/6 es Mediada por Cambios en la Expresión de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 en el Enterocito

Las proteinas NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 participan en la absorcion intestinal de colesterol. Ezetimiba inhibe este proceso bloqueando a NPC1L1, sin embargo, su efecto sobre ABCG5 y ABCG8 aun no esta claro. Asi, el objetivo del presente trabajo fue evaluar en ratones C57BL/6 con hipercolesterolemia inducida por dieta y tratados con ezetimiba, la expresion de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 mediante PCR en tiempo real y Western blot, en 3 grupos de animales: 1, dieta hipercolesterolemica D12336; 2, dieta D12336 mas 5 mg/kg/dia de ezetimiba; 3, dieta control. El nivel serico de colesterol total fue significativamente diferente entre los grupos estudiados (control: 1,85 ± 0,49 mmol/L; dieta D12336: 3,11 ± 0,73 mmol/L; ezetimiba: 2,11 ± 0,50 mmol/L, P = 0,001). La expresion genica de NPC1L1 aumento 5,4 veces en el grupo que recibio la dieta D12336 (P = 0,003). Por otro lado, la expresion genica de ABCG5 y ABCG8 no fue diferente en el grupo con hipercolesterolemia (P = 0,239 y P = 0,201, respectivamente). Despues del tratamiento con ezetimiba, la expresion genica de ABCG5 se incremento 15,6 veces (P = 0.038). No hubo diferencias significativas en la expresion genica de NPC1L1 (P = 0,134) y ABCG8 (P = 0,067). En relacion a la expresion proteica, la dieta D12336 incremento los niveles de expresion de NPC1L1 (P = 0,022) y ABCG5 (P = 0,008); el tratamiento con ezetimiba incremento los niveles de NPC1L1 (P = 0,048) y redujo los niveles de ABCG5 (P = 0,036) y ABCG8 (P = 0,016). En conclusion, nuestros resultados sugieren que tanto la dieta hipercolesterolemica como el tratamiento con ezetimiba, en un modelo experimental, afectan los niveles de expresion de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8, sugiriendo que ABCG5 y ABCG8 estan involucrados en la respuesta hipolipemiante a este farmaco. No obstante, el mecanismo mediante el cual se explica esta interaccion requiere de un futuro estudio.

Polimorfismos genéticos de APOA5 se asocian a hipertrigliceridemia e hiperglicemia en individuos chilenos con enfermedad coronaria y controles

Introduccion: Diversas variantes geneticas han sido relacionadas al desarrollo de enfermedad coronaria y/o sus factores de riesgo; entre ellas, los polimorfismos S19W y -1131T>C del gen que codifica para la apolipoproteina A5 (APOA5). Asi, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible asociacion entre las variantes S19W y -1131T>C del gen APOA5 y enfermedad coronaria en individuos chilenos. Metodos: Se evaluaron 425 sujetos adultos, no relacionados; 209 pacientes con enfermedad coronaria (EC) comprobada por angiografia (estenosis→ 70%), con edades entre 33 y 74 anos, y 216 individuos controles (30 a 68 anos). La genotipificacion de los polimorfismos S19Wy -1131T>C del gen APOA5 fue realizada mediante la tecnica de PCR-RFLP Resultados: La distribucion de los genotipos para el polimorfismo S19W del gen APOA5 en el grupo casos (SS: 80%, SW: 19% y WW: 1%) y en el grupo control (SS: 82%, SW: 17% y WW: 1%) fue semejante (p=NS). La distribucion genotipica para el polimorfismo -1131T>C en pacientes con EC (TT: 56%, TC: 37%, y CC: 7%) y controles (TT: 63%, TC: 30% y CC: 7%) fue similar (p=NS). Las ORs relacionadas a los alelos mutados 19W (1.12; I.C.95%, 0.72- 1.74, p=NS)y-1131C (1.19; I.C.95%,, 0.87- 1.63, p=NS), confirman la ausencia de asociacion. Por otro lado, las concentraciones de trigliceridos y glucosa en ayunas fueron significativamente mas elevadas en los sujetos portadores de los alelos 19Wy -1131C, tanto en casos como en controles (p<0.05). Conclusion: La asociacion observada entre las variantes geneticas de APOA5 y las altas concentraciones sericas de trigliceridos y glucosa, en ambos grupos, sugiere que estos polimorfismos podrian contribuir al desarrollo de la dislipidemia diabetica; un reconocido factor de riesgo para enfermedad arterial coronaria.

Effect of Five Single Nucleotide Polymorphisms of ABCG5 and ABCG8 Genes on Ezetimibe Lipid-Lowering Response

En este estudio se evaluo la posible asociacion entre cinco polimorfismos de nucleotido unico en los genes ABCG5 (rs6720173) y ABCG8 (rs11887534, rs4148211, rs4148217 y rs6544718) y la respuesta a ezetimiba en pacientes hipercolesterolemicos chilenos. Un total de 60 individuos hipercolesterolemicos, no relacionados, con edades entre 18 y 65 anos fueron incluidos. Estos sujetos fueron tratados con ezetimiba (10mg/dia) durante un mes. Los genotipos de ABCG5 y ABCG8 fueron evaluados por PCR-RFLP. La distribucion de genotipos de los polimorfismos de ABCG5/ABCG8 se encontraba en equilibrio de Hardy-Weinberg. Nuestros resultados mostraron que los polimorfismos estudiados no se asociaron con la respuesta a la ezetimiba. Sin embargo, el alelo T del polimorfismo rs6544718 fue relacionado con niveles basales elevados de LDL-colesterol (p <0,001). Ademas, el alelo G para el polimorfismo rs4148211 se asocio con una mayor concentracion basal de trigliceridos (p = 0,019). Este alelo tambien se asocio con concentraciones mas bajas de HDL-colesterol (p = 0,027), despues del tratamiento con ezetimiba. Nuestros resultados sugieren que los polimorfismos estudiados no afectan a la respuesta terapeutica a la ezetimiba en los sujetos evaluados.

Presencia del alelo T para el polimorfismo rs2781666 G>T del gen arginasa 1 constituye un factor protector contra enfermedad arterial coronaria

Resumen:Introduccion: Variaciones moleculares en el gen de la arginasa I, ARG1, podrian provocar un aumento de la expresion de la enzima o de su actividad, lo que puede llevar a una disfuncion endotelial al disminuir la produccion de oxido nitrico por parte de la eNOS. Asi, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible asociacion del polimorfismo rs2781666 G>T y la pre-sencia de enfermedad coronaria (confirmada con an-giografia) en individuos de la region de La Araucania. Material y Metodos: En el presente estudio, de tipo casos y controles, fueron evaluados 247 sujetos, con edades entre 30 y 74 anos; 124 individuos pacientes con enfermedad arterial coronaria (casos) y 123 contro-les. La genotipificacion del polimorfismo rs2781666 del gen ARG1 fue realizada mediante PCR- RFLP. Resultados: La frecuencia del genotipo homocigo-to TT para el polimorfismo rs2781666 del gen ARG1 fue de 6.5% en el grupo casos y 8% en el grupo control, difiriendo significativamente (p=0.032). La frecuencia relativa del alelo T tambien presento diferencias sig-nificativas entre casos y controles (0.230 vs. 0.325, p=0.031). La OR relacionada al alelo mutado T fue de 0.63 (I.C. 95%, 0.43 – 0.94), confirmando la presencia de la asociacion observada.

Polimorfismo SNP-43 del gen de Calpaína-10 en individuos con enfermedad coronaria y controles

Resumen: La Diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) es un reconocido factor de riesgo cardiovascular que ha mostrado aso-ciacion con aterosclerosis subclinica; lo cual podria ser explicado por la presencia de una base genetica comun entre ambas patologias. Varios polimorfismos del gen de calpaina-10 (CAPN10) han sido asociados con insulino resistencia y DMT2, sin embargo, existe escasa evidencia de su relacion con enfermedad coro-naria. El objetivo del presente estudio fue evaluar la posible asociacion de la variante SNP-43 de CAPN10 con el desarrollo de enfermedad coronaria en indivi-duos del sur de Chile. Metodos: Fueron incluidos en este estudio, 218 pacien-tes adultos no relacionados con enfermedad arterial coro-naria (EAC) confirmada mediante angiografia (estenosis >70%) y 194 individuos controles. La variante genetica UCSNP-43 fue estudiada por PCR-RFLP. Resultados: No se observaron diferencias significati-vas entre las frecuencias genotipicas de la variante UC-SNP-43 en pacientes con EAC (GG: 51.4 %; GA: 42.7 %; AA: 5.9 %) y controles (GG: 59.6%; GA: 35.1%; AA: 5.2%, p=0.228). Similarmente, no hubo diferencias significativas entre las frecuencias alelicas entre pacien-tes con EAC y controles (p=0.200). La Odds Ratio fue de 1.17 (I.C. 95%: 0.50–2.72), confirmando la ausencia reasociacion.Conclusion: Nuestros datos sugieren que la variante UCSNP-43 del gen CAPN10 no esta asociada a la pre-sencia de enfermedad arterial coronaria en la poblacion investigada.