Luciano Coutinho Silva

In vitro propagation of Campomanesia rufa: An endangered fruit species

The Campomanesia rufa is a fruitful species native from Brazil considered as endangered by the IUC (International Union for Conservation of Nature) and low information regarding its propagation is available. In this context, the aim of the present study was to develop in vitro germination, micropropagation and callogenesis protocols for the species. For in vitro germination, seeds were inoculated in MS medium supplemented with GA3 (gibberellic acid) and for shoot induction, the medium was supplemented with three different cytokinins BA (benzyladenine), BAP (6-Benzylaminopurine) or TDZ (Thidiazuron). For shoot growth, culture medium containing BA, BAP, TDZ were maintained under white fluorescent lamps and blue:red light-emitting diodes (LED). GA3 was also tested on in vitro shoot elongation. For oxidation control, the medium was supplemented with PVP (polyvinylpyrrolidone) and for callus induction, 2.4-D (dichlorophenoxyacetic acid). The results showed 68% germination regardless of GA3 concentration. In the propagation stage, BAP at 4.5 μM induced a higher number of shoots (4.53) and LED lamps as the light source combined with the culture medium with 1 μM BAP induced a higher number of shoots (4.08). The highest average of C. rufa length (31.9 mm) was obtained using 8.8 μM GA3. The use of PVP (584.3 uM) controls up to 27.3% oxidation in young leaf explants. The use of 10 μM 2.4-D leads to a higher callus formation (58.7 %). Therefore, it can be concluded that the use of BAP is efficient in the induction of shoots, PVP controls oxidation leaf segments, and 2.4-D induces callus in C. rufa.

Cryopreservation of coffee zygotic embryos: dehydration and osmotic rehydration

A conservacao dos recursos geneticos vegetais e uma medida importante para prevencao do processo de erosao genetica. Bancos de sementes sao as formas mais comuns de conservacao ex situ, entretanto, sementes de cafeeiro nao podem ser armazenadas por metodos convencionais. A criopreservacao e uma alternativa viavel para conservacao em longo prazo de especies, como o cafeeiro, que produzem sementes intermediarias ou recalcitrantes. O objetivo deste trabalho foi criopreservar embrioes zigoticos de Coffea arabica L. cv Catuai Vermelho avaliando o efeito da desidratacao antes da criopreservacao, e da reidratacao osmotica apos o descongelamento. Antes da criopreservacao foram testados e determinados os teores de umidade em diferentes tempos de desidratacao (0, 15, 30, 60 e 120 min). Apos a desidratacao os embrioes foram criopreservados por uma hora em nitrogenio liquido, e apos o descongelamento foram reidratados utilizando solucao osmotica. Para avaliacao da viabilidade de embrioes desidratados e/ou criopreservados, utilizou-se o teste com o cloreto de 2,3,5-trifenil tetrazolio. Embrioes nao desidratados nao sobreviveram ao congelamento. Embrioes desidratados ate cerca de 20% de umidade que nao passaram por uma reidratacao osmocondicionada, nao germinaram. Embrioes desidratados ate cerca de 20% de umidade, criopreservados e reidratados lentamente apos o descongelamento, apresentaram 98% de germinacao. A maxima viabilidade obtida atraves do teste de tetrazolio foi 75% apos 60 minutos de desidratacao. Portanto, embrioes zigoticos de cafeeiro podem ser criopreservados utilizando desidratacao fisica em silica gel por 60 minutos (23% de teor de umidade), seguida de reidratacao com solucao osmotica apos o descongelamento. Esse metodo permitiu a germinacao de 98% dos embrioes criopreservados.