Omar G. Alvarado-Gómez

Géneros de Trichogrammatidae1 en México Asociados a Cultivos Agrícolas y Áreas Naturales Aledañas

Abstract. Trichogrammatid parasitoids were collected from agricultural and adjacent natural areas from the states of Coahuila, Durango, Sinaloa, Chihuahua, Nuevo León, Sonora, Jalisco, Guerrero, Hidalgo, and Zacatecas, in Mexico, during 2006-2008. Insect samples were obtained by sweeping the vegetation and by collecting eggs of nine crop pest species from several host plants for the states of Sonora, Chihuahua, Coahuila, and Tamaulipas, during 2007 and 2008. All wasps were placed and preserved in 1.5-ml plastic vials containing 70% ethanol. Some specimens were mounted on slides for further identification. A total of 1,535 trichogrammatid specimens was collected, which were identified to 20 genera of Trichogrammatidae. The genus Trichogramma Westwood was the most abundant (24.6%), followed by Paracentrobia Howard (23.8%), Oligosita Walker (19.0%), and Ufens Girault (12.5%). The remaining 16 genera comprised 20.1% of the insect specimens collected. From four to 15 genera of trichogrammatids were found in each of the states sampled. Thirteen genera of trichogrammatids were collected in 25 agricultural crops, where the genera Trichogramma, Oligosita, Paracentrobia, and Ufens were present in a greater number of agricultural crops. Crops such as orange, Citrus spp.; pecans, Carya illinoinensis (Wangenh.) K. Koch; grapes, Vitis vinifera L.; alfalfa, Medicago sativa L.; and maize, Zea mays L., had the greatest number of trichogrammatids. Furthermore, the genera Paracentrobia, Trichogramma, Ufens, and Haeckeliania Girault were obtained from eggs of nine insect pest hosts. The genus Trichogrammatella Girault is a new record for México. Another 15 genera are reported for the first time for some states, in particular for Guerrero and Hidalgo. Most of the genera found constitute new records.

Differentiation and Phylogeny of Trichogrammatidae (Hymenoptera: Chacidoidea) from Mexico Based on ITS2 and 18S Molecular Markers of rDNAr and COII of the mDNA

Abstract. A great diversity of trichogrammatids (35 genera) has been reported for Mexico. Particularly, several species of the genus Trichogramme are widely used as biological control agents in integrated agricultural pest management programs in Mexico. The identification of trichogrammatid wasps based on morphological characters is complicated. A feasible alternative to those taxonomic problems is the utilization of molecular techniques. Therefore, the objectives of the present study were to differentiate the most common genera of Trichogrammatidae, and infer their phylogeny, based on the molecular markers ITS2 and 18S of the rDNA and COII of the mDNA. Thus, individual wasps of Ittys, Aphelinoidea, Paracentrobia, Pseudoligosita, Ufens, Burksiella, Zagella, and Trichogramma were subjected to DNA extraction, DNA amplification by PCR, and phylogenetic analysis by the maximum parsimony (MP) method, based on the use of the molecular markers ITS2 and 18S of ribosomal DNA (rDNA) and COM of mitochondrial DNA (mDNA). PCR-product sizes of the region ITS2 varied from 450 to 700 bp for the more common genera of Trichogrammatidae from Mexico, which is useful for the taxonomic studies of these parasitic wasps. On the contrary, PCR-product sizes of the regions 18S and COII did not vary among genera, whose values were about 790 and 300 bp, respectively. PCR-product sizes of the regions ITS2 Y COII for most of trichogrammatid genera are reported for the first time. Phylogenies obtained based on the sequences of the ITS2 region were congruent with the current classification of Trichogrammatidae based on morphological characters. Resumen. Una gran diversidad de tricogramátidos (35 géneros) se han reportado para México. Particularmente varias especies del género Trichogramme se utilizan ampliamente como agentes de control biológico en los programas de manejo integrado de plagas agrícolas en México. La identificación de las avispas tricogramátidos mediante caracteres morfológicos es compleja. Una alternativa factible a la problemática anterior, es la utilización de técnicas moleculares. Por lo anterior el objetivo del presente estudio fue diferenciar los géneros de Trichogrammatidae más comunes de México, e inferir su filogenia basándose en los marcadores moleculares ITS2 y 18S del ADNr y COII del ADNm. Los tamaños de los fragmentos de PCR de la región ITS2 del ADNr variaron de 450 a 700pb en los géneros de Trichogrammatidae, lo cual es de gran utilidad en estudios taxonómicos de estas avispas parasíticas. Por el contrario, las regiones 18S del ADNr y COII del ADNm no mostraron variación en los tamaños de los fragmentas de PCR, siendo éstos de alrededor de 790 y 300pb, respectivamente, para los diferentes géneros. Se reporta por primera vez los tamaños de productos de PCR de las regiones ITS2 Y COII para la mayoría de los géneros analizados. Las filogenias inferidas mediante el mátodo de maxima parsimonia (MP), difirieron entre marcadores moleculares. Las filogenias inferidas mediante las secuencias de la región ITS2 fueron congruentes con la clasificación basada en caracteres morfológicos de géneros de Trichogrammatidae actualmente aceptada.

Management of Bactericera cockerelli (Sulc) (Hemiptera: Triozidae) in Greenhouses with Entomopathogenic Fungi (Hypocreales)

Abstract. Research on entomopathogenic fungi has been conducted to control the potato psyllid, Bactericera cockerelli, to find new strategies and because of its mode of action, that, unlike other entomopathogenic microorganisms, does not require being ingested. Two Beauveria bassiana strains, a wild type (BB42) and a commercial (BB09), and two Metarhizium anisopliae strains (MA25 and MA28) were used at 1×107 spores ml-1, on B. cockerelli nymphs on chili peppers under greenhouse conditions. Three applications (at 1, 3, and 5 days) killed 36% (MA25) to 47% (BB09), achieving more control than imidacloprid.

Parasitoides del Gusano Barrenador de la Nuez, Acrobasis nuxvorella Neunzig1 en La Comarca Lagunera, México

Resumen. Se identificaron los parasitoides y el grado de parasitismo del gusano barrenador de la nuez (GBN), Acrobasis nuxvorella Neunzig, en huertas de nogal pecanero de la Comarca Lagunera (zona que comprende parte de Coahuila y Durango, México). El parasitismo en huevos varió del 0 al 13% y en larvas del 17.2 al 18.5%. Los parasitoides de huevos del GBN pertenecieron al género Trichogramma. Los parasitoides pertenecen a dos órdenes, seis familias, 12 géneros y 12 especies, parasitando larvas, principalmente, y pupas de A. nuxvorella. Orden Hymenoptera: Apanteles epinotiae Viereck y Macrocentrus instabilis Muesebeck (Braconidae), Goniozus ca nephantidis Muesebeck (Bethylidae), Venturia macilenta nitida Wahl y Eiphosoma vitticolle Cresson (Ichneumonidae), Bugacia sp. (Pteromalidae) y Doliopria sp. (Diapriidae). Orden Diptera: Athrycia sp., Archytas sp., Uclecya sp., Jurinia sp.1 y Jurinia sp.2 (Tachinidae). Los parasitoides de larvas y pupas más abundantes fueron A. epinotiae (24.6%), G. ca nephantidis (14.8%), M. instabilis (11.5%), y Archytas sp. (11.5%). Todas las especies y géneros de parasitoides del GBN encontrados constituyen nuevos registros en México, excepto M. instabilis.

Identificación de Biotipos del Complejo Bemisia tabaci L.1 y sus Begomovirus Asociados, en Coahuila y Durango, México

Resumen. La mosca blanca Bemisia tabaci L. transmite begomovirus a cucurbitáceas en la Comarca Lagunera de Coahuila y Durango, México. Bemisia tabaci es una plaga que causa daños al alimentarse de la savia de las plantas y tiene la capacidad de transmitir virus, se caracteriza por ser un complejo de especies cripticas morfológicamente indistinguibles que pueden ser reconocidas por medio de técnicas moleculares. Durante 2015 y 2016, se analizaron moscas blancas para identificar los biotipos B, Q y nuevo mundo por PCR múltiple usando primers específicos basados en el gen mitocondrial citocromo oxidasa I. También se determinó la presencia de begomovirus en B. tabaci y en plantas en localidades productoras de Coahuila y Durango, mediante el uso de PCR con oligonucleotidos degenerados. Las secuencias obtenidas en el presente trabajo al ser comparadas con la base de datos del GenBank del NCBI, corroboraron la identificación del biotipo B con una similitud del 100% con secuencias tipo. En las muestras de 2015 se determinó que el begomovirus predominante en las moscas blancas fue el virus del mosaico dorado del chile (PepGMV) con 100% de similitud; mientras que en 2016 prevaleció el virus de la hoja arrugada de las cucurbitáceas (CLCrV) con un 97% de similitud.

Densidades de Insectos Vectores, Incidencia de Enfermedades y Detección Molecular de Fitopatógenos Asociados en Tomate

Resumen. El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar las densidades de insectos vectores y la Incidencia de enfermedades en tomate; así como detectar los patógenos asociados. Para ello se realizaron muestreos de la mosca blanca del camote (MBC), Bemisia tabaci (Gennadius), psílido del tomate, Bactericera cockerelli (Sulc), plantas con síntomas del rizado de la hoja amarilla del tomate (TYLC) y permanente del tomate (PT), principalmente, en los híbridos de tomate Sahel y TOP 1182 plantados en primavera y verano. Además se extrajo y amplificó el DNA mediante PCR de muestras de tomate y de adultos de la MBC y del psílido del tomate, para la detección de Ca. L. solanacearum y Begomovirus. Las densidades de MBC y psílido del tomate; así como los porcentajes de plantas enfermas por el TYLC y el PT variaron principalmente entre épocas de trasplante y a través del ciclo de desarrollo del tomate. La Incidencia del TYLC mostró diferencias significativas entre híbridos de tomate. Los patógenos Ca. L. solanacearum y Begomovirus se detectaron en plantas de tomate con síntomas de PT y TYLC, respectivamente. El psílido del tomate fue portador de Ca. L. solanacearum; mientras que la MBC fue portadora de Begomovirus. Existió una asociación estrecha entre la presencia de los patógenos en los insectos vectores y sus grados de Incidencia en el cultivo de tomate.

Densidades de Bactericera cockerelli (Sulc)1 e Incidencia del “Permanente del Tomate” en Diferentes Condiciones de Producción del Tomate

Resumen. El psílido del tomate, Bactericera cockerelli (Sulc), es una plaga de importancia primaria en los cultivos de papa y tomate en Estados Unidos, México, Centro y Sud América, debido a que causa desórdenes fisiológicos y enfermedades fitoplásmicas, y bacterianas. El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar las densidades de la plaga y la incidencia del permanente del tomate (PT), Candidatus Liberibacter solanacearum, bajo producción del tomate a cielo abierto y en casa sombra, con y sin control con insecticidas. Se identificó a través de PCR que el agente causal fue Candidatus Liberibacter solanacearum. Las densidades del psílido del tomate y la incidencia del PT fueron significativamente menores en casas sombras que en la producción del tomate a cielo abierto. Se observó una relación estrecha entre las densidades del insecto, la incidencia del PT y el rendimiento comercial de tomate, de tal manera que al incrementarse las poblaciones del insecto se observó un incremento del PT (2% en casa sombra / 44% a cielo abierto), y a su vez una reducción del rendimiento comercial del tomate hasta de 39%.

Caracterización morfológica y molecular de aislados de Macrophomina phaseolina asociados a caña de azúcar en México

Charcoal rot caused by Macrophomina phaseolina is an important disease of sugarcane in Mexico. This study was carried out to characterize isolates of M. phaseolina obtained from sugarcane by the combination of morphological and molecular analyses. The morphological characterization of 10 isolates was performed using scanning electron microscopy and light microscopy. To confirm the morphological identification, rDNA from two representative isolates was extracted, and the internal transcribed spacer (ITS) region was amplified by polymerase chain reaction and sequenced using specific primers MpKF1 and MpKR1. Based on their morphological characteristics, all isolates were identified as M. phaseolina. Moreover, the analysis of two ITS sequences showed 100% similarity with the M. phaseolina sequences deposited in the GenBank. To our knowledge, this is the first study in the world aimed at characterizing isolates of M. phaseolina obtained from sugarcane.