С середины 1990-х годов развитие технологии секвенирования нового поколения (NGS) преобразило сферу биотехнологий. Технология NGS успешно способствовала революции в геномике благодаря своей высокой производительности, скорости и относительно низкой стоимости. Эта технология не только позволяет исследователям получать огромные объемы геномных данных за короткий промежуток времени, но и делает возможным анализ и применение этих данных. Будь то диагностика заболеваний, персонализированная медицина или генная терапия, потенциал NGS безграничен. р>
В прошлом, хотя традиционный метод секвенирования по Сэнгеру был надежным, его скорость и эффективность были относительно низкими, что ограничивало прогресс геномики. Технология NGS использует миллионы параллельных реакций секвенирования для получения миллиардов данных секвенирования в каждом эксперименте. Согласно отчету, каждый запуск NGS может получить до 4,3 млрд коротких последовательностей. Этот объем данных позволяет геномным исследованиям преодолеть предыдущие узкие места. р>
«Развитие технологии секвенирования нового поколения позволило геномике перейти от теоретических исследований в лабораторных условиях к эпохе практического применения».
Операции NGS основаны на нескольких ключевых этапах: во-первых, создание библиотеки ДНК-секвенирования, а затем секвенирование путем синтеза. Этот метод использует огромные объемы данных и позволяет одновременно анализировать несколько последовательностей генов, что значительно повышает эффективность работы. В отличие от секвенирования по Сэнгеру, NGS избегает этапа физического разделения, что означает, что исследователи могут получить широкий спектр данных за один процесс. р>
Среди многочисленных платформ NGS некоторые используют амплифицированные шаблоны отдельных молекул, в то время как другие полагаются на независимые шаблоны молекул ДНК. Распространенные методы амплификации включают эмульсионную ПЦР, амплификацию по методу катящегося кольца и твердофазную амплификацию. Каждая технология амплификации имеет свои уникальные преимущества, особенно в плане повышения точности и надежности секвенирования. р>
Среди них метод эмульсионной ПЦР гарантирует наличие только одной матрицы ДНК в каждом микрореакторе ПЦР, что позволяет избежать перекрестного загрязнения и ошибок секвенирования. Это повышает точность данных на протяжении всего процесса. Алгоритм амплификации по принципу катящегося кольца позволяет исследователям решать задачи скрининга, сохраняя при этом высокую производительность. р>«Эффективная подготовка шаблона — ключ к обеспечению успеха секвенирования NGS».
Технология NGS не только достигла значительного прогресса в выводе данных, но и ее методы секвенирования также постоянно развиваются. В настоящее время основными методами секвенирования являются синтетическое секвенирование, импульсное секвенирование и секвенирование на основе лигирования. Каждый метод уникален как с точки зрения баланса между скоростью обработки данных, так и с точки зрения точности. р>
Например, в основе синтетического секвенирования лежит синтез ДНК с помощью ДНК-полимеразы, тогда как при лигированном секвенировании для соединения зондов с целью получения данных секвенирования используется ДНК-лигаза. Эти достижения не только улучшили пропускную способность данных, но и облегчили различные применения секвенирования генов, особенно в патологии и генетических исследованиях. р>
«Революционный прогресс технологии NGS заключается не только в технологических прорывах, но и в новых идеях, которые она предоставляет для ранней диагностики и лечения заболеваний».
Хотя технология NGS имеет большой потенциал, она все еще сталкивается с рядом проблем. Во-первых, взрывной рост объема данных делает анализ данных утомительным и сложным процессом. Исследователям необходимы эффективные вычислительные ресурсы и передовые алгоритмы для обработки и интерпретации этих данных. Кроме того, в будущем необходимо будет уделить внимание вопросу обеспечения обмена данными и защиты конфиденциальности персональных данных. р>
Однако эти проблемы также открывают новые возможности в смежных областях благодаря достижениям в области искусственного интеллекта, автоматизации и других биотехнологий. Будущее геномики будет в большей степени зависеть от междисциплинарного сотрудничества, объединяющего биологию, науку о данных и здравоохранение для достижения комплексного перехода от последовательностей генов к прогнозированию состояния здоровья. р>
Как в эту эпоху постоянных изменений технология секвенирования следующего поколения приведет нас в новую эру геномики? р>