Bruno Estevão de Souza

Artificial fertilization of oocytes and sperm activation in pacu: effects of the spermatozoa:oocyte ratio, water volume, and in natura semen preservation

Objetivou-se foi avaliar a fertilizacao artificial e a duracao da motilidade espermatica em pacus com diferentes doses inseminantes, volumes de agua e preservacao do semen in natura. Foram realizados quatro experimentos para avaliacao do efeito de doses inseminantes (7x103, 7x104, 7x105, 7x106 e 7x107 espermatozoides ovocito-1) sobre a fertilizacao artificial dos ovocitos; do efeito do volume de agua (0,5; 15,0; 30,0; 45,0 e 60,0 mL de agua mL-1 de ovocitos) com doses inseminantes de 105.481 e 210.963 espermatozoides ovocito-1; do efeito de diluicao do semen (0,005; 0,05; 0,5 e 5,0 µL de semen mL-1 de agua) sobre a duracao da motilidade espermatica; e do efeito do armazenamento a 15 oC por 9 h sobre a duracao da motilidade espermatica e o indice de sobrevivencia espermatica. Os maiores resultados obtidos foram: doses inseminantes entre 7x103 e 7x107 espermatozoides ovocito-1; 15 a 60 mL de agua mL-1 de ovocitos; diluicao de 0.005 µL semen mL-1 de agua e 98,65% de sobrevivencia espermatica ate o tempo de preservacao de 2h45min36s. A preservacao a 15oC por 9 horas nao influencia a duracao da motilidade espermatica. As maiores taxas de fertilizacao podem ser observadas no emprego de 0,27 a 270 µL de semen mL-1 de ovocitos, com 15 a 60 mL de agua para ativacao.

Dose inseminante para fertilização artificial de ovócitos de dourado

Objetivou-se determinar a dose inseminante adequada para uso na fertilizacao artificial de ovocitos de dourado (Salminus brasiliensis). Os ovocitos foram distribuidos em delineamento inteiramente casualizado, e fertilizados com uma das relacoes espermatozoides/ovocito 6,0×103; 6,0×104; 6,0×105; 6,0×106 ou 3,0×107, cada uma com quatro repeticoes. Considerou-se unidade experimental uma incubadora de volume util de 2,5 L, contendo 2,0 mL de ovocitos nao-hidratados. As taxas de fertilizacao foram mensuradas 8 horas apos o inicio da fertilizacao. Com intuito de verificar possiveis efeitos da diluicao seminal na movimentacao dos espermatozoides, realizou-se a mensuracao do tempo de duracao da motilidade espermatica dos espermatozoides de dourado, ativados por meio de diferentes relacoes de diluicao: 6,8×10-5; 6,8×10-4; 6,8×10-3; 6,8×10-2; 3,4×10-1 e 1,0 mL de semen por mL de agua. O tempo de duracao da motilidade foi avaliado em delineamento inteiramente casualizado composto de seis tratamentos e tres repeticoes. As taxas de fertilizacao apresentaram relacao quadratica com o numero de espermatozoides por ovocito. As relacoes de diluicao do semen tiveram efeito inversamente proporcional sobre a duracao da motilidade espermatica. A relacao que proporcionou melhores taxas de fertilizacao artificial de ovocitos de dourado (Salminus brasiliensis) foi de 30.722 espermatozoides por ovocio.

Motilidade espermática, fertilização dos ovócitos e eclosão dos ovos de Jundiá em água contaminada por cádmio

The objective of this work was to evaluate the effect of water contaminated by cadmium on the rates of oocyte fertilization and egg hatching, and sperm motility duration on jundia catfish (Rhamdia quelen). Two trials were performed: in trial 1, it was evaluated the effect of cadmium on the artificial fertilization of oocytes and egg hatching and in trial 2, the effects of cadmium on the sperm motility duration were evaluated. In both trials, it was used a completely randomized experimental design with five levels of cadmium in the water (0; 20; 50; 80 and 110 mg L-1) evaluated with four (trial 1) or three replicates (trial 2). Fertilization and hatching rates showed linear response, remaining constant up to the levels of 28.6 and 40.4 mg L-1, respectively. From these levels, a linear effect inversely proportional between the fertilization and hatching rates and an increase in the levels of cadmium occurred. The increase on the level of cadium in the water had an inverse linear effect of sperm motility duration providing a reduction from 21.8s in clean water to 10.6s in contaminated water containing 110 mg L-1. Levels from 20.0 to 28.6 mg L-1 influence sperm and oocytes of jundia catfish, respectively.

Effects of the spermatozoa: oocyte ratio, water volume and water temperature on artificial fertilization and sperm activation of cascudo-preto

The objective of this study was to evaluate the effects of water volume and water temperature on the sperm motility duration and the number of spermatozoa, and the water volume on the fertilization rates of oocytes of Rhinelepis aspera. Experiments were carried out to evaluate the effect of semen dilutions (1.74×10-5, 1.74×10-4, 1.74×10-3, 1.74×10-2, 1.74×10-1 and 1.00 mL of sperm.mL-1 of water) and water temperature (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, and 50 oC) on spermatozoa motility duration. In addition, the effects of insemination dose (7×103, 7×104, 7×105, 7×106 and 7×107 spermatozoa.oocyte-1) and water volume (1.0, 30.0, 60.0, 90.0 and 120.0 mL water.2.0 mL-1 oocytes) on the artificial fertilization rates of oocytes were evaluated. The longest sperm motility duration were observed for the semen dilution of 1.74×10-5 mL semen.mL-1 water and in water at 5 oC. The highest fertilization rates were obtained for insemination doses between 7.00×103 and 1.23×107 spermatozoa. oocyte-1 and water volume of 28.11 mL water.2.0 mL-1 oocytes.