Christian L Herrera

The antifungal effect of six commercial extracts of Chilean propolis on Candida spp

Propolis has been used in traditional medicine for many centuries because of its beneficial health properties, including its antimicrobial capacity. Prosthesis stomatitis affects a significant percentage of users of removable dentures; Candida albicans is the most common fungal species associated with the development of this pathology. Thus, the objectives of this study were: a. To evaluate the antifungal activity of six commercial propolis extracts against Candida spp. that was isolated from the oral cavity of removable dentures users, and b. To determine chemical characteristics of the propolis extracts evaluated. Among the results, we note that these concentrations of polyphenols varied between 9 ± 0.3 and 85 ± 2.1 mg mL-1. Chromatographic analysis was able to detect 35 compounds, among which were caffeic acid, myricetin, quercetin, kaempferol, apigenin, pinocembrin, galangin, and caffeic acid phenyl ester (CAPE). All strains tested were inhibited by the liquid extracts of propolis. The MID ranged between 1:40 and 1:1280, and the MIC for C. albicans ranged from 197 µg mL-1 to 441 µg mL-1. From the results obtained in this investigation, we can conclude that all propolis extracts evaluated are capable of inhibiting the development of Candida spp. However, they show significant differences in the concentration of polyphenols present and in antifungal activity. El propoleo ha sido utilizado por la medicina tradicional desde hace muchos siglos debido a sus propiedades beneficas para la salud, entre las que destaca su capacidad antimicrobiana. La estomatitis subprotesica, afecta a un porcentaje importante de usuarios de protesis dental removible, siendo Candida albicans la especie fungica mas comun asociada al desarrollo de esta patologia. Asi, los objetivos de este estudio fueron: a) evaluar la actividad antifungica de seis extractos de propoleos comerciales sobre cepas de Candida spp. aisladas de la cavidad oral de usuarios de protesis dental removible, y b) determinar algunas caracteristicas quimicas de los extractos de propoleos utilizados. Entre los resultados obtenidos, podemos senalar que estos mostraron concentraciones de polifenoles que variaron entre 9 ± 0,3 y 85 ± 2,1 mg/mL. El analisis cromatografico permitio detectar 35 compuestos, entre los cuales se logro identificar la presencia de acido cafeico, miricetina, quercetina, kaempferol, apigenina, pinocembrina, galangina y acido cafeico fenil ester (CAPE). Todas las cepas de Candida spp. evaluadas fueron inhibidas por los seis extractos liquidos de propoleos, observandose que la DIM vario entre 1/40 y 1/1280, y la CIM para C. albicans vario entre 197 µg/mL y 441 µg/mL. A partir de los resultados obtenidos en esta investigacion podemos concluir que todos los propoleos evaluados son capaces de inhibir el desarrollo de Candida spp. , sin embargo, estos muestran importantes diferencias en la concentracion de los polifenoles presentes y en la actividad antifungica.

Chemical and botanical characterization of Chilean propolis and biological activity on cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus

Propolis is a non-toxic natural substance with multiple pharmacological properties including anti-cancer, antioxidant, fungicidal, antibacterial, antiviral, and anti-inflammatory among others. The aim of this study was to determine the chemical and botanical characterization of Chilean propolis samples and to evaluate their biological activity against the cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Twenty propolis samples were obtained from beekeeping producers from the central and southern regions of Chile. The botanical profile was determined by palynological analysis. Total phenolic contents were determined using colorimetric assays. Reverse phase HPLC and HPLC-MS were used to determine the chemical composition. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined on S. mutans and S. sobrinus. All propolis samples were dominated by structures from native plant species. The characterization by HPLC/MS, evidenced the presence of quercetin, myricetin, kaempferol, rutine, pinocembrin, coumaric acid, caffeic acid and caffeic acid phenethyl ester, that have already been described in these propolis with conventional HPLC. Although all propolis samples inhibited the mutans streptococci growth, it was observed a wide spectrum of action (MIC 0.90 to 8.22 μg mL−1). Given that results it becomes increasingly evident the need of standardization procedures, where we combine both the determination of botanical and the chemical characterization of the extracts. Research conducted to date, describes a promising effectiveness of propolis in the prevention of caries and other diseases of the oral cavity, making it necessary to develop studies to identify and understand the therapeutic targets or mechanisms of molecular action of the various compounds present on them.

Effect of Chilean propolis on cariogenic bacteria Lactobacillus fermentum

La caries dental es una de las enfermedades infecciosas mas prevalentes en el mundo. Entre las bacterias involucradas en esta patologia se encuentran Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Actinomyces spp. y Lactobacillus spp. La industria farmaceutica ha volcado sus esfuerzos al descubrimiento de nuevos productos antibacterianos ante el aumento de resistencia a los ya conocidos. El propoleos se ha utilizado como tal, desde tiempos antiguos, por lo que se ha investigado su efecto contra variados microorganismos. En este estudio se evaluo el efecto antimicrobiano de seis extractos etanolicos comerciales de propoleos, sobre la bacteria Lactobacillus fermentum. Esta fue aislada luego de su identificacion mediante PCR con el uso de primers especie especificos, posterior al cultivo microbiologico de muestras de caries de pacientes con indicacion de extraccion de pieza dental, y se detecto en 9 de 40 pacientes, correspondiendo a un 22%. El estudio de susceptibilidad se realizo mediante dilucion en microplacas y se comprobo la actividad antimicrobiana en cuatro de los seis extractos etanolicos de propoleos utilizados, difiriendo en la concentracion efectiva contra el microorganismo, lo que puede ser atribuido a factores como el origen botanico, el lugar geografico y la estacion de recoleccion. Los propoleos mostraron concentraciones de polifenoles que variaron entre 9 ± 0,3 y 85 ± 2,1 mg/mL. El analisis cromatografico permitio detectar la presencia de acido cafeico, miricetina, quercetina, kaempferol, apigenina, pinocembrina, galangina y acido cafeico fenil ester (CAPE). Nuestro estudio demuestra la accion antimicrobiana del propoleos sobre L. fermentum, patogeno relacionado al desarrollo de caries.

Detección Molecular de Estreptococos Cariogénicos en Saliva

Streptococcus mutans y Streptococcus sobrinus han sido indicados como los principales agentes etiologicos de la caries dental. Sin embargo, los metodos microbiologicos y bioquimicos, disponibles actualmente en Chile, no permiten la rapida deteccion e identificacion de estas bacterias. El objetivo de este trabajo fue implementar la metodologia de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) para detectar la presencia de S. mutans y S. sobrinus en saliva. Participaron de este estudio 51 escolares (5 a 17 anos), provenientes de cinco diferentes colegios de la ciudad de Temuco; a los cuales se les realizo recuento de estreptococos del grupo mutans en saliva por metodo microbiologico y la diferenciacion de especies por la tecnica de PCR. Los resultados mostraron que la sensibilidad para la tecnica de PCR fue 1000 UFC/mL de saliva, diez veces superior a la sensibilidad del metodo microbiologico utilizado (10.000 UFC/mL). Ademas, el analisis de la especificidad de la amplificacion, evaluada por restriccion enzimatica, confirmo la presencia de las bacterias investigadas. La prevalencia de S. mutans fue de 88.2% y para S. sobrinus de 11.8%. La presencia conjunta de ambas bacterias fue observada en 7.8% de los individuos. En conclusion, podemos senalar que la metodologia implementada es util para la deteccion rapida de S. mutans y S. sobrinus en saliva.

Asociación de polimorfismos de los genes CRF-BP, SLC6A4 y restricción alimentaria crónica: un estudio preliminar

BACKGROUND Restrained eaters (RE) are a group of individuals who constantly restrict their eating. However, they usually alternate restriction with periods of overeating. AIM To evaluate the possible association of CRF-BP and SLC6A4 gene polymorphisms with chronic alimentary restriction. MATERIAL AND METHODS The Spanish version of the Revised Restraint Scale was applied to 132 women aged 18 to 25 years. They were divided in a group classified as restrained eaters (RE) and a group of unrestrained eaters. The 5-HTTLPR and CRF-BPs11 polymorphisms of the SLC6A4 and CRF-BP genes were evaluated by polymerase chain reaction (PCR) and PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP), respectively. RESULTS There was a significant association between the s/s homozygous genotype for the 5-HTTLPR polymorphism of SLC6A4 gene and RE condition (p = 0.033). However, this association was not observed for the CRF-BPs11 polymorphism. CONCLUSIONS The presence of s/s genotype is associated with the RE condition, being the presence of a s allele, a risk factor for this condition.

Association of polymorphisms within the Renin-Angiotensin System with metabolic syndrome in a cohort of Chilean subjects

OBJECTIVE Metabolic syndrome (MetS) is associated with hypertension, obesity and dyslipidemia. Thus, genetic variants related with these conditions may modulate its development. We evaluated the effect of polymorphisms in the renin-angiotensin system (RAS) on metabolic syndrome risk in a cohort of Chilean subjects. SUBJECTS AND METHODS A total of 152 subjects, 83 with MetS (51.2 ± 9.6 years) and 69 without MetS (49.5 ± 9.3 years) of both genders were included, according to the ATP III update criteria. The rs4340 Insertion/Deletion (I/D), rs699 (T>C) and rs5186 (A>C) of the ACE, AGT and AGTR1 genes, respectively, were genotyped. RESULTS After adjusting for age and gender, we observed the DD genotype of rs4340 associated with MetS (p = 0.02). Specifically, the DD genotype was associated with MetS risk in women (OR = 4.62, 95%CI, 1.41 - 15.04; p < 0.01). In males, the AA genotype for rs5186 variant was associated with an increased risk for developing MetS when compared with women carrying the same genotype (OR = 3.2; 95%CI, 1.03 - 9.89; p = 0.04). In subjects without MetS, DD genotype was associated with increased waist circumference (p = 0.023) while subjects with MetS carrying the rs5186 TT genotype showed higher levels of HDL-cholesterol (p = 0.031). CONCLUSION The present study contributes data highlighting the role for RAS polymorphisms in predisposing to metabolic syndrome in Chilean subjects.

El Propóleos Reduce la Esteatosis Hepática Inducida por Dieta en Ratones

El higado graso no alcoholico (HGNA), comprende un amplio espectro de lesiones, que van desde esteatosis hepatica, hasta cirrosis y carcinoma hepatocelular, siendo sus principales factores de riesgo los desordenes asociados a sindrome metabolico (SM). El propoleos, sustancias resinosa elaborada por Apis mellifera para la proteccion de la colmena, ha demostrado un efecto hepatoprotector, asi el objetivo de esta investigacion fue evaluar el efecto de un propoleos chileno sobre el desarrollo de esteatosis hepatica no alcoholica en ratones C57BL/6J sometidos a una dieta aterogenica tipo Paigen. Veintiocho ratones (C57BL/6J), divididos en: 1, dieta balanceada (CH); 2, dieta hipercolesterolemica (HC); 3, dieta HC + 10 mg/kg/dia de propoleos (BP); 4, dieta HC + 40 mg/kg/dia de propoleos (AP). Despues de 16 semanas, se determino la concentracion de glucosa, colesterol total, trigliceridos y los niveles de alanina aminotransferasa (ALAT). El tejido hepatico fue fijado en una solucion de formalina tamponada al 10% para, posteriormente, ser incluido en paraplast y tenido con Hematoxilina-Eosina y fragmanetos congelados a -30C fijados en formalina tenidos con tincion Oil red O. No existieron diferencias en la concentracion de glucosa ni trigliceridos, a diferencia del colesterol total, entre el grupo alimentado con dieta balanceada (CH) y los alimentados con la dieta aterogenica D12336 (HC, BP y AP). De la misma forma se observo que existen diferencias en los niveles de actividad de ALAT entre los grupos estudiados, destacando su reduccion en los grupos suplementados con propoleos (BP y AP). De forma concordante, la histoarquitectura del grupo HC, mostro esteatosis simple y focos de infiltrado leucocitario en el lobulillo hepatico, observandose una disminucion gradual de las alteraciones en los grupos de BP y AP. En conclusion, el propoleos chileno estudiado disminuye la esteatosis hepatica inducida por la dieta aterogenica tipo Paigen en ratones C57BL/6J, sin embargo, los mecanismos implicados en esta actividad hepatoprotectora tienen que ser identificados.

Polimorfismo C373G del Gen PECAM-1 en Individuos Chilenos con Enfermedad Coronaria y Controles

La molecula de adhesion celular endotelial plaquetaria-1 (PECAM-1) es una glicoproteina de membrana expresada por celulas endoteliales, plaquetas, monocitos, neutro filos y algunos tipos de linfocitos T. Constituye una pieza clave en la extravasacion de leucocitos a traves de las uniones intercelulares del endotelio vascular durante el proceso inflamatorio. El objetivo de nuestro estudio fue determinar la asociacion entre el polimorfismo C373G (Leul25 Val) del gen PECAM-1 y enfermedad coronaria, en individuos chilenos. Se estudio un total de 220 individuos (112 casos y 108 controles). La presencia de enfermedad coronaria fue confirmada mediante angiografia (estenosis > 70%). El polimorfismo C373G, fue detectado mediante la tecnica de reaccion en cadena de polimerasa seguida de restriccion enzimatica. Las frecuencias genotipicas observadas en ambos grupos cumplen con la ley de Hardy-Weinberg. La distribucion de genotipos como la frecuencia relativa de alelos para el polimorfismo C373G del gen PECAM-1, fueron similares entre casos y controles (p = 0.820 y p = 0.739, respectivamente). Ademas, la OR asociada al alelo mutado G fue 0.92 (I.C. 95%, 0.54-1.57; p= NS). Los datos obtenidos sugieren que el polimorfismo C373G del gen PECAM-1 no esta asociado a enfermedad coronaria en la poblacion analizada