Mariana Rojas

The Effect of Parathion on Mouse Testicular and Epididymal Development Cultured in Chicken Allantochorion

Parathion is a widely used organophosphoric pesticide which has also been reported to interfere with mouse spermatogenesis. Moreover it has been related to prenatal toxicity in mammals. Sixteen A/ Snell mice were sacrificed at day 17 of pregnancy. Testes and epididymides of the male fetuses were implanted in the allantochorion of chicken eggs. Three experimental conditions of the egg injections were considered: Group I: 1 ml of parathion (0.5 mg/ml), Group II: 1 ml of parathion (1 mg/ml), and Group III: 1 ml distilled water (control group). The implanted subjects continued their development for 4 days (i.e. to complete the gestational period for mice). The cell proliferation and differentiation of the epithelial cells of the epididymis were evaluated with the use of the monoclonal antiproliferating cell nuclear antigen (PCNA-cyclin) antibody, and the AE1 keratin complex antibody. Parathion altered the allantochorion, as 15% of the chicken embryos died in Group I and 40% in Group II, vs. only 8% in controls (Group III). However, no malformations were seen in the surviving embryos. In the testicular implants, the seminiferous cords of Group I had the same cytological characteristics of germ and pre-Sertoli cells as the control, except for involuting Leydig cells. Contrarily, in the cases with higher doses of parathion (Group II), there was a complete disorganisation of the seminiferous cords and the interstitium. In some testes, hyaline degeneration of the seminiferous cords was observed. No cell proliferation was evident, and the epididymal morphology was apparently unaffected. Therefore, parathion seems to interfere with normal testicular differentiation. However, in spite of interstitial damage, the epididymal development seems unaltered. Since the epididymis is an androgen-dependent organ, it may be postulated that testosterone production is still sufficient to support epididymal development but not spermatogenic cell line differentiation.

Distribution of keratins, vimentin, and actin in the testis of two South American camelids: Vicuna (Vicugna vicugna) and llama (Lama glama). An immunohistochemical study

The purpose of the present study was to investigate the pattern of distribution of cytokeratins, vimentin and muscular actin in the testis of vicuna (Vicugna vicugna) and llama (Lama glama) two species of camelids native of the Andean high plateau of South America.

Células Troncales Derivadas del Tejido Adiposo

Con el objeto de regenerar organos y funciones se han estudiado las celulas troncales. Las celulas troncales adultas poseen la ventaja que pueden ser obtenidas de individuos adultos sin los problemas eticos que trae el uso de celulas embrionicas. La obtencion de celulas troncales desde el tejido adiposo (ASCs) ha sido una revolucion el tema ya que estas celulas pueden ser obtenidas en grandes cantidades, con minimo disconfort y hasta con anestesia local. Si comparamos las ASCs versus las celulas troncales derivadas de la medula osea (BM-MSCs) sus caracteristicas fenotipicas y el potencial de diferenciacion son muy similares. En esta revision veremos la tecnica de obtencion de ACSs, sus caracteristicas moleculares, su capacidad de diferenciacion en los linajes mesodermicos y no mesodermicos, los estudios preclinicos y clinicos mas importantes realizados, asi como las perspectivas en el uso a futuro.

Experiencias de Blog: Placenta Comparada

Las Tics son hoy en dia la metodologia de vanguardia utilizada en todos los niveles de la ensenanza, por ello disenamos un blogspot sobre Placenta Comparada. Los visitantes encontraron contenidos e imagenes originales en las diferentes etapas del desarrollo. Se utilizaron 10 placentas humanas y 14 de animales para las imagenes y material educativo del blog, estas se fotografiaron macroscopica y mesoscopicamente, posteriormente se procesaron mediante tecnicas histologicas. Para la evaluacion de las visitas al blogs se utilizaron parametros estadisticos pertenecientes al formato blogs, entre los meses de mayo a diciembre de 2010 y una encuesta de opinion en relacion a los item: fotografia, diseno del blog y video de alumbramiento. La estadistica del blog mostro: un numero de 9057 visitas, que en su totalidad fue publico hispanohablante. El tema mas buscado fue caracteristicas macroscopicas de placenta humana; entre las palabras clave, placenta humana, de raton y conejo entre otras. El sistema operativo mas utilizado fue Windows y el buscador preferido, Explorer. La encuesta aplicada arrojo los siguientes resultados: los encuestados fueron mayoritariamente mujeres del area de la obstetricia, el acceso al blog fue a traves de docentes. El blog cumplio en un 80,6% la expectativa del visitante, al 62% le parecio atractivo, ordenado y didactico. El 57,4% considero las imagenes explicativas, de facil comprension, novedosas y el 27,8 % requeria de conocimiento previo para el contenido del blog. De los aspectos microscopicos el 59,2% las valoro como explicativas, de facil comprension, novedosas; igual calificacion recibio en un 50% el video de alumbramiento y en un 36% anexos embrionarios y variaciones de placenta humana. Placenta comparada fue calificada como novedosa en un 27,8% y en un 34,3% requeria conocimiento previo. Los resultados mostraron que la metodologia blog es valorada para el aprendizaje, en lo clinico, en el autoaprendizaje como material original de apoyo, e incluso para el publico no experto es novedoso y sorprendente.

Aspectos moleculares en la formación de la cara y del paladar

En mamiferos, la adhesion y fusion de los procesos faciales y palatinos, son mecanismos esenciales en el desarrollo del paladar primario y secundario. La falla de cualquiera de estos procesos trae como consecuencia la formacion de labio leporino o fisura palatina. En ambos casos, los procesos opuestos adhieren a traves de desmosomas para formar una lamina epitelial media la cual desaparece por transformacion epitelio-mesenquimatica. La apoptosis ocurre solo en las celulas del periderma. En el paladar secundario, estos procesos estan regulados por TGFs-3, pero este factor no esta presente en los procesos maxilares o nasales que forman el paladar primario, por lo cual en la formacion del labio actuarian otros factores tales como Shh (sonic hedgehog) y BMP (proteina morfogenetica de hueso), que ya se ha demostrado estan involucrados en la fusion del labio de pollo

Estudio comparado entre métodos de enseñanza tradicional y computacional en histología humana

RESUMEN: Se han realizado diversos estudios de la metodologia docente en Anatomia y se ha observado que el uso de programas computacionales es de gran utilidad en el proceso de ensenanza aprendizaje. Nuestro interes fue evaluar el impacto que tiene el uso de los computadores en la ensenanza de la Histologia Humana Normal. Se trabajo con alumnos del segundo ano de la Carrera de Obstetricia y Puericultura de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. Para las actividades practicas el curso fue dividido en dos grupos (A y B). El grupo A trabajo en la sala de Multimedia de la Facultad de Medicina, con disposicion de un computador por alumno y acceso a imagenes complementarias impresas a color. El grupo B, trabajo en el laboratorio de microscopia tradicional y con sesiones de proyeccion de diapositivas. Los profesores se distribuyeron de acuerdo a sus preferencias metodologicas. Las evaluaciones fueron sobre la base de diapositivas disenadas especialmente e imagenes impresas a color. Paralelamente se realizo un cuestionario de preferencias sobre las metodologias empleadas durante el curso. En los resultados, no hubo diferencias significativas del promedio general de notas entre grupos, sin embargo, el cuestionario de opiniones mostro que los alumnos preferieren el uso de computadores e imagenes impresas para aprender Histologia. Estos resultados permiten sugerir que la metodologia interactiva de ensenanza, basada en el reforzamiento a traves del computador, es un complemento util a los metodos tradicionales de docencia en Histologia.

Epiblast Embryo Stem Cells Give Origin to Adult Pluripotent Cell Populations: Primordial Germ Cell, Pericytic and Haematopoyetic Stem Cells. A Review

Las celulas madre adultas son una gran promesa para el futuro de la terapia regenerativa, y la comprension de su origen embrionario permite la discriminacion de las fuentes de celulas madre. Las celulas madre embrionarias derivadas del macizo celular interno del blastocisto originan las celulas germinales primordiales, y celulas madre periciticas asociadas al endotelio de los vasos del saco vitelino. En la actualidad, se propone que las celulas germinales primordiales embrionarias podrian originar a las celulas madre hematopoyeticas sobre la base de la deteccion de marcadores de celulas germinales (SSEA-1/TEC-1 oct-4 y Nanog) en celulas madre extraidas de higado fetal y medula osea. Sin embargo, diferentes evidencias experimentales apuntan hacia dos vias separadas de diferenciacion en celulas germinales primordiales, y en celulas madre hematopoyeticas con el mismo origen embrionario. La expresion de marcadores de celulas madre no diferenciadas en el cordon umbilical y los vasos de la placenta, como CD34, CXCR4, c-kit y OcT4 demuestra la intima relacion entre las celulas madre periciticas, el endotelio y las celulas germinales primordiales, las que se originan en celulas madre embrionarias a partir del epiblasto del macizo celular interno.

OSTEOGÉNESIS COMPARATIVA DE LOS CARTÍLAGOS SECUNDARIOS DE LA CLAVÍCULA Y PLACAS EPIFISIARIAS DE LOS HUESOS LARGOS

La clavicula es un hueso formado por osificacion membranosa, es decir no se preforma de cartilago. Sin embargo desarrolla cartilagos secundarios como centros de crecimiento, los cuales presentan diferencias morfologicas y funcionales con los cartilagos de crecimiento de los huesos largos. Estos ultimos son cartilagos primarios derivados del modelo cartilaginoso original. Se realizo un estudio histologico e inmunohistoquimico de los cartilagos secundarios de la clavicula y de los cartilagos de crecimiento del femur y humero, en fetos humanos, entre las 12 y 40 semanas de gestacion y en ratones entre 15 dias de gestacion y 20 dias de edad. Se utilizaron las siguientes tinciones: hematoxilina-eosina-azul Alcian, tricromico de Masson y rojo de picrosirius. En la tecnica inmunohistoquimica de inmunoperoxidasa se utilizaron como anticuerpos primarios vimentina, PCNA y BMP. Los cartilagos claviculares son cartilagos hialinos cubiertos por una delgada capa de tejido mesenquimatico. En su superficie se distinguen varias capas: superficial de tejido conectivo, proliferativa formada por celulas mesenquimaticas, madurativa con condrocitos hipertroficos y una zona de osificacion con condrocitos en regresion y trabeculas oseas en formacion. El anticuerpo anti PCNA mostro inmunotincion positiva en la capa proliferativa en todas las etapas estudiadas y el anticuerpo anti BMP se expreso intensamente en las celulas de las zonas de osificacion. La tecnica de picrosirius mostro colageno tipo I en las capas superficiales. En los cartilagos claviculares la proliferacion ocurre en el mesenquima de la capa proliferativa, en cambio, en los huesos largos la actividad mitotica ocurre en la zona de cartilago hiperplasico. En los cartilagos claviculares existe colageno tipo I, a diferencia del cartilago de crecimiento epifisiario donde solo existe colageno tipo II. Los cartilagos secundarios de la clavicula presentan importantes diferencias morfologicas y funcionales en el crecimiento con los cartilagos primarios de los huesos largos

Obtaiment of Pudu (Pudu pudu) deer Embryos by the Somatic Nuclear Transfer Technique

Los objetivos de este trabajo fueron los de producir embriones de pudu, obtenidos por la transferencia de nucleos de fibroblastos de la oreja de pudu en ovocitos de un rumiante domesticos que es el bovino. Para posteriormente en un trabajo futuro proceder a la transferencia de embriones de pudu, al utero de hembras receptoras sincronizadas de otra especie. Se obtuvieron biopsias de 1 mm aproximadamente del borde externo de la orejas de dos ciervos pudu machos del jardin zoologico Buin-Zoo, Santiago de Chile. Las lineas celulares han sido establecidas y conservadas segun los protocolos utilizados para las bovinos. Los ovocitos son obtenidos por puncion del complejo cumulos-ovocito (COC).desde ovarios de vacas recuperados del matadero. Cada ovocito es enucleado y fusionado con un fibroblasto aislado insertado bajo la zona pelucida. La fusion de membranas celulares es obtenida por choques electricos. En cuanto a la cronologia, observamos que al segundo dia se forma una etapa de dos blastomeras, al tercer dia morulas de 8 a 16 celulas, y desde el cuarto dia se ha diferenciado como blastocisto, el cual al septimo dia termina por eclosionar de la zona pelucida La obtencion de blastocistos embrionarios indica que es posible obtener embriones de pudu mediante clonaje heteroespecifico, aunque, el porcentaje de exito obtenido es relativamente bajo. Queda aun por verificar la viabilidad de los embriones asi obtenidos despues de la transferencia in utero

A proposed explanation for the development of the torus palatinus.

The torus palatinus (TP) is an exostosis of the hard palate. The discovery of these exostoses usually occurs incidentally during a routine clinical exam, as they usually do not produce symptoms, except in cases of significant growth or in edentulous patients, in which case they may hinder an oral prosthesis (Garcı́a-Garcı́a et al., 2010). The exact cause of the TP is not clear (Sirirungrojying and Kerdpon, 1999; Sonnier et al., 1999; Jainkittivong and Langlais, 2000; Al-Bayaty et al., 2001). The most widely accepted theory today is that these represent genetic traits (Gorsky et al., 1998; Kerdpon and Sirirungrojying, 1999; Sirirungrojying and Kerdpon, 1999; Sonnier et al., 1999; Jainkittivong and Langlais, 2000; Al-Bayaty et al., 2001; Bruce et al., 2004), but it has not always been possible to show the autosomal dominant nature of these structures (Bruce et al., 2004, Eggen and Natvig, 1994). Others (Halffman et al., 1992; Haugen, 1992; Eggen et al., 1994; Gorsky et al., 1996) have considered that TP results from an interplay of genetic and environmental factors, mainly factors related to occlusal stress (Garcı́a-Garcı́a et al., 2010). Another explanation was reported by Cagirankaya et al. (2004) where they tested the hypothesis that a TP is associated with a well-developed maxilla by comparing the occurrence of third maxillary molar agenesis with the presence or absence of TP in a group of patients, concluding that the association between the presence of maxillary third molars and a TP in female subjects was statistically significant. In other words, the presence of TP would be bound to a normal structural development, and this localization on the median palatine suture of the bony palate suggest that the presence of TP could reflect the development of the maxilla. In some individuals, the margins of the median palatine suture are raised into a palatine torus and may be composed either of compact bone or of a shell of compact bone with a center of cancellous bone (Cagirankaya et al., 2010). Based on this hypothesis, another possible explanation for this condition might suggest that conformational changes occur at the level of the median palatal suture in the fetal stage (Fig. 1). With the development of the vomer, sutural growth sites probably are shifted to the inferiorly. This may result in osteogenic cells of the sutural area that contact and mix with the adjacent area in the lower palatal periosteum, which is being developed as an area of rapid bone deposition. As resistance to the lateral processes of the palate increase, sutural osteogenic cell growth could be extruded on the oral surface of the palate. Therefore, it seems possible that the formation of a bony ridge could result from the removal of cells with growth potential from their intrasutural position to the edges where there is lower sutural growth processes (Latham, 1971). There are conflicting results about the age at which the TP appears (Reichart et al., 1988; AlBayaty et al., 2001; Cagirankaya et al., 2010), According to a study by Bruce et al. (2004), the average age when these are seen is 34 years. AlBayaty et al. (2001) found that the average age was 30.7 years. Although most studies have found a common age range for such onset to be between 30 and 50 years old (Eggen et al., 1994; Bruce et al., 2004), Haugen et al. (1992) reported an onset as