Ismael Bernardo Fonseca

Identificación de Colágeno I y III con Picrosirius Red/ Polarización en el Estroma de Tumores Salivales

El estroma juega un rol importante en los procesos tumorales de invasion y metastasis. Las fibras de colageno tipo I son el principal componente estructural del estroma en distintos tumores. Sin embargo, hay muy pocos estudios en los tumores de glandulas salivales. Basandonos en estos antecedentes el objetivo de la presente comunicacion fue estudiar las caracteristicas del colageno con Picrosirius red/polarizacion en tumores benignos y malignos de glandulas salivales para evaluar su posible rol en los mecanismos de progresion tumoral. Cortes histologicos de adenoma pleomorfico, carcinoma adenoide quistico y carcinoma epitelial mioepitelial se colorearon con H/E y Picrosirius red y se examinaron con microscopio de polarizacion. La birrefringencia del colageno con Picrosirius/polarizacion resulto diferente en el estroma de los tumores malignos (carcinoma adenoide quistico y carcinoma epitelial mioepitelial), con predominio de colageno I, en comparacion con el tumor benigno (adenoma pleomorfico), con predominio de colageno III. El diferente perfil de coloracion en las fibras colagenas producidas en el estroma de los tumores analizados podria relacionarse con diferentes mecanismos de expansion tumoral, los que fueron poco estudiados en los tumores de glandulas salivales. Mas estudios son necesarios para obtener resultados mas concluyentes que contribuyan al diagnostico, pronostico y tratamiento.

Biological Effects Produced by Intense Pulsed Light (Xe-Cl) on the Cartilage of the Tongue Chick Embryo Using Various Filters

El laser utilizado correctamente en la practica medica ofrece claras ventajas cuando se compara con las terapias tradicionales. La mejoria e incluso la eliminacion significativa de muchas lesiones cutaneas se pueden lograr con riesgos reducidos para los pacientes. Sin embargo, es importante guardar medidas de seguridad y conocer los posibles efectos en un modelo experimental. El embrion de pollo es un buen modelo para evaluar los efectos directos de radiaciones no ionizantes por su facil manipulacion y disponibilidad. El objetivo del presente trabajo es comunicar los cambios histopatologicos en organos del embrion de pollo con y sin barrera de proteccion al ser sometido a radiacion excimer. Se utilizo el siguiente elemento emisor: luz pulsada intensa (Xe-Cl excimer laser de 308 nm de longitud de onda. Se irradiaron los embriones a traves de una ventana abierta en la cascara del huevo. Los huevos fueron mantenidos asepticamente por 24 hs en una incubadora. Las barreras de proteccion utilizadas fueron vidrio con y sin color, latex, celofan, papel, policarbonato de diferentes colores y espesores. Los resultados mas sobresalientes, sin barrera y con barreras transparentes y de color verde fueron: intensa vasocongestion, edema y focosde necrosis. Se concluye que las modificaciones tisulares observadas son compatibles con posibles efectos fototermicos colaterales de estas radiaciones los que nos advierten sobre posibles efectos adversos cuando las mismas se aplican indiscriminadamente. Creemos que es de importancia estudiar los diferentes medios que permitan resguardar la seguridad de los pacientes y operadores.

Estudio Morfométrico Comparativo de la Corteza Cerebelosa Humana en Dos Grupos Etarios

Histologicamente la corteza del cerebelo humano adulto presenta tres capas constitutivas; la capa molecular, la hilera de los cuerpos de las celulas de Purkinje y la capa granulosa interna. La sustancia cortical del cerebelo de los embriones de mamifero, asi como la de los jovenes, muestran una capa granular externa. Nuestro objetivo es documentar las diferencias morfologicas entre las capas de la corteza cerebelosa adulta y joven. Se realizaron estudios morfometricos microscopicos en 20 cerebelos de autopsias. Los casos se dividieron en dos grupos, adultos y ninos menores de 1 ano. Se realizaron cortes en parafina, coloreados con hematoxilina y eosina. La corteza del cerebelo adulto presento diferencias morfologicas con la de los recien nacidos. En el cerebelo adulto presenta tres capas constitutivas, mientras que en el recien nacido presenta una cuarta capa, la granulosa externa.

Myelo peroxidase as an Indicator of Oxidative Stress in Metabolic Syndrome

Background: Increased myeloperoxidase (MPO) activity would be the link between the rise of the inflammatory response and oxidative stress (OS) in metabolic syndrome (MS). Objective: The aim of this study was to determine the enzymatic activity of MPO associated with OS in animals with MS and establish their relationship with probable cardiovascular injury. Methods: Male Wistar rats were divided into two groups: Group A, control (n=12) and Group B, induced MS (n=12). Metabolic syndrome was produced by 6-week administration of 10% fructose diluted in the drinking water. Insulin (mU/ml), glucose (mg/dl), lipid panel (mg/dl), HOMA (homeostatic model assessment), MPO (IU/ml) and superoxide dismutase (SOD) activity (U/ml) were measured. Light microscopy was used for the histological study of the heart and thoracic aorta. Results: Group B showed significantly increased levels of plasma glucose (176±17.3 mg/dl), insulin (29.5±4.52 mU/ml), HOMA (11±1.3), total cholesterol (133±9.6 mg/dl) and triglycerides (75±12.9 mg/dl) compared with Group A: plasma glucose (115±1.1 mg/dl), insulin (4±0.82 mU/ml), HOMA (3±0.38), total cholesterol (69.7±1.6 mg/dl) and triglycerides (46.2±6 mg/dl), (p<0.001 for all variables). A significant decrease in HDL (28.3±1.14 mg/dl) in Group B vs. Group A (61±1.0 mg/dl) (p<0.001) validated the experimental MS model. Myeloperoxidase activity increased significantly in Group B (181.3±15.7 IU/ml) vs. Group A (116.07±4.2 IU/ml) (p<0.001). A similar behavior was seen with SOD antioxidant activity in Group B (181±6 U/ml) vs. Group A (138±3.6 U/ml) (p <0.01). Light microscopy of the heart and thoracic aorta revealed histopathological changes in animals with induced MS. Conclusion: Increased MPO and SOD in Group B would indicate the presence of OS in MS, with consequences at the vascular level.

Inflammatory and oxidative stress markers as indicator of atherogenesis in rats: antioxidants as preventive pharmacological methods.

OBJECTIVE The oxidative process in atherogenesis generated by proinflammatory induction and response to antioxidants vitamins in an experimental model were analyzed. METHODS Male rats were used: (A)Control, (B)Control+vitamin E plus C, (C)Hyperfibrinogenemia and (D)Hyperfibrinogenemia+vitamins E plus C. Hyperfibrinogenemia induced by daily injection of adrenaline (0.1mg/day/rat) for 120 days. TREATMENT 3.42 mg/kg of vitamin E plus 2.14 mg/kg of vitamin C, fifteen days after induction. Vascular histology analyzed by optical microscopy. Fibrinogen, nitrites and superoxide dismutase analyzed by spectrophotometry. STATISTICS MANOVA, Hotelling test for post testing, significance level p<0.05. RESULTS (C) group showed higher fibrinogen than (A) and (B)(p<0.001). Compared to (C) group, (D) showed a decrease of fibrinogen (p<0.001). A marked increase in nitrites was found in (C) versus (A), (B) and (D) groups (p<0.001). Superoxide dismutase activity increased in (C) group compared to groups (A) and (B) (p<0.001). In the group (D) an increase of the activity of this enzyme was observed in comparison to groups (C)(p<0.001), (A) and (B) (p<0.0001 in both). The (C) group shown endothelial denudation, thickening of the vascular intima and extracellular matrix enlargement with foam cells(p<0.001). CONCLUSION These results strongly suggest that vitamins E plus C produce regression of inflammatory and oxidative stress processes in this experimental model.

Carcinoma de Células Claras Variedad No Hialinizante de Parótida: Comunicación de Dos Casos con Diferente Grado de Diferenciación

El carcinoma de celulas claras es una neoplasia rara de bajo grado que se desarrolla casi exclusivamente en glandulas salivales menores humanas. El objetivo de esta comunicacion es analizar las caracteristicas estructurales, histoquimicas e inmunohistoquimicas (IHQ) de dos casos de carcinoma de celulas claras de parotida y realizar el diagnostico diferencial con otros tumores salivales primarios y metastasicos que presentan celulas claras. Cortes de ambos tumores fueron procesados para H/E, tricromicos de Masson y Dane, Azul de toluidina, Azul alciano, PAS y PAS/diastasa; marcaciones IHQ para citoqueratinas de bajo y alto peso molecular, ki67, HMB45, p63 y proteina S-100. El patron estructural de estos tumores estaba determinado por nidos y cordones de celulas claras delimitados por un estroma no hialinizado. En un tumor se observo una neoplasia maligna a celulas claras con manifiesta anaplasia. La expresion de ki67 fue importante. El otro tumor estaba constituido por celulas claras monomorfas sin signos manifiestos de atipia y casi nula expresion de ki67. Con PAS se demostro la presencia de glucogeno y no se observo un desarrollo importante del estroma colageno en ambas neoplasias. En ambos casos resulto francamente positiva la inmunomarcacion para citoqueratinas de bajo y alto peso molecular. Por el contrario resulto negativa para HMB45 y p63. La proteina S-100 tuvo su expresion en celulas aisladas. Se concluye que los casos presentados son de localizacion poco comun (parotida) segun lo descripto en la bibliografia; corresponden a la variedad no hialinizante ya que no esta presente un importante estroma colageno hialinizado, y ambos tumores son primarios de glandulas salivales, de origen epitelial, no melanocitico ni hematopoyetico (linfomas) como lo demuestran las marcaciones IHQ.

Carcinoma Mucoepidermoide de Glándulas Salivales: Factores Pronósticos Histológicos e Inmunohistoquímicos

Los tumores de las glandulas salivales representan entre el 2 y 3% de las neoplasias de cabeza y cuello. El carcinoma mucoepidermoide (CME) es el tumor maligno mas comun en las glandulas salivales; su comportamiento biologico se relaciona con el grado histologico tumoral (bajo, intermedio y alto). Esta formado por celulas mucosas, epidermoides, intermedias, columnares y claras. El objetivo del presente trabajo fue presentar la casuistica de CME de nuestro laboratorio en el periodo 1999-2009 para determinar grado histologico y potencial proliferativo como factores pronosticos ya que estos son importantes para guiar el tratamiento y disenar recomendaciones para los pacientes. Cortes seriados de 13 casos de CME se colorearon con H/E, Masson, PAS, Dane/Alcian blue y Azul de toluidina. Se realizo inmunomarcacion para ki67. Se analizo su grado histologico segun el sistema de gradacion tumoral de Auclair et al., que evalua variables observables con microscopio optico. 8 tumores se localizaron en parotida, 3 en paladar, 1 en submandibular y 1 en glandulas genianas. Histologicamente 3 casos fueron de alto grado, 2 de grado intermedio y 8 de bajo grado, segun sus caracteristicas citologicas, patron de invasion y tipo celular. En dos casos de bajo grado se observaron cristales de colesterol, macrofagos y celulas gigantes de cuerpo extrano. La expresion de ki67 fue importante en tumores de alto grado. La parotida fue la mas afectada seguida por paladar y submaxilar, lo que acuerda con la bibliografia. El grado histologico tumoral se asocio con la expresion de Ki 67, factores pronosticos relevantes en el CME, que deben asociarse a estudios cinicos y analisis de supervivencia. Continuaremos el presente trabajo con la realizacion de estudios de los residuos azucares terminales y subterminales de los carbohidratos con lectinhistoquimica, para detectar modificaciones sutiles de la glicosilacion de las proteinas celulares, rasgo comun en el proceso de transformacion neoplasica.

Hematoma Disecante de la Parte Torácica de la Aorta: Estudio Anatomopatológico de Siete Casos de Autopsias

El hematoma disecante de aorta (HDA) se define como la diseccion de la pared aortica por la sangre, con formacion de una nueva luz. Es la patologia letal de la aorta mas frecuentemente diagnosticada y ocurre con una frecuencia tres veces mayor que la rotura del aneurisma de la aorta abdominal. Nuestro objetivo es presentar siete casos de HDA observados en autopsias, describir los hallazgos anatomopatologicos y comentar la literatura. Los casos estudiados corresponden al Servicio de Patologia del Instituto de Medicina Forense de Cordoba, Argentina. Los tejidos fueron fijados en formol al 10%, incluidos en parafina y coloreados con hematoxilina-eosina, tricromico de Masson y PAS (Peryodic Acid Schiff). De los siete casos presentados cuatro correspondieron a mujeres (57,1%) y tres a hombres (42,8%). Todos los casos estudiados tenian antecedentes de hipertension arterial. La evolucion posible de la diseccion aortica incluye: rotura de la adventicia con hemorragia masiva y muerte, comunicacion nuevamente con la luz aortica, propagacion al ostium coronario, isquemia de organos y la formacion de un aneurisma.

Carcinoma Sebáceo/Mioepitelial de Parótida: Análisis Histopatológico e Inmunohistoquímico

El carcinoma epitelial-mioepitelial (CEM) de glandulas salivales es un tumor maligno bifasico de bajo grado, que comprende aproximadamente el 1% de todos los tumores salivales. Se describe un raro caso de CEM sebaceo de glandula parotida en un hombre al que se le realizo parotidectomia izquierda por formacion tumoral aparentemente encapsulada. Para su estudio histopatologico e inmunohistoquimico el material se coloreo con H/E, tricromicos de Masson y Dane/Azul alciano, PAS/H, Azul de toluidina, antigeno epitelial de membrana (EMA), citoqueratinas (CK) de bajo peso molecular, a actina de musculo liso (a-SMA) y S-100. Los cortes histologicos mostraron un patron multinodular con nidos tumorales constituidos por estructuras tubulares delimitadas por: a-celulas acidofilas luminales cuboideas; b- celulas claras adluminales. Las celulas ductales luminales se marcaron positivamente con los anticuerpos para EMA y CK. Se observo inmunorreactividad positiva para a-SMA y S-100 en las celulas claras. Se observaron areas de diferenciacion sebacea dentro de la masa tumoral. Los estudios inmunohistoquimicos confirman la presencia de celulas tumorales ductales y mioepiteliales. Ademas, las celulas claras mioepiteliales constituyen un elemento importante para el diagnostico diferencial entre CEM sebaceo y adenocarcinoma sebaceo.

Tumores Estromales Extra-gastrointestinales (EGISTs): Revisión de 4 Casos con Análisis Inmunohistoquímico

Los tumores del estroma gastrointestinal o GISTs son neoplasias pertenecientes a los sarcomas de partes blandas y pueden localizarse en cualquier sitio del organismo. Los mas frecuentes ocurren en el tracto gastrointestinal (del esofago al recto), de hecho, mas del 50% se presentan a nivel gastrico. No obstante, se han descrito en otras regiones (mesenterio y omento, retroperitoneo, vesicula biliar, pared vesical y utero). Estos ultimos de localizacion extragastrointestinal han sido publicados con el acronimo EGIST y representan el 5 % de todos los GISTs. Se presentan 4 casos de EGIST, describimos los hallazgos anatomopatologicos, los aspectos clinicos y el perfil inmunohistoquimico. Se estudiaron 32 casos de GISTs mediante analisis prospectivo y retrospectivo, de los archivos correspondientes al Servicio y IIa Catedra de Patologia de la Facultad de Ciencias Medicas, Hospitales Cordoba y Nuestra Sra. de la Misericordia, de Cordoba (Argentina), entre los anos 1987 y 2008. De dicha serie, se extrajeron y analizaron cuatro casos (2 mesentericos y 2 retroperitoneales). Todos los casos fueron pacientes de sexo femenino entre 42 y 72 anos, que consultaron por dolor abdominal, dolor pelvico y perdida de peso. El tamano tumoral oscilo entre 4 y 28 cm. Todas las masas tumorales eran parcialmente quisticas, exhibiendo hemorragia y necrosis, en grado variable. Microscopicamente, se observaron los 2 patrones: fusocelular y epitelioide, de aspecto laxo, dispuestos en haces entrelazados con bajo indice mitotico. Panel inmunohistoquimico: Vimentina, CD34 y CD117: Positivos. Actina, cromogranina y S-100: Negativos. Ki 67: Positivo del 2 al 10 %. Diagnostico: Tumor estromal extragastrointestinal de tipo borderline. La principal peculiaridad de los casos fue su localizacion. Los criterios diagnosticos de certeza deben considerar, en conjunto: los aspectos clinicos, histopatologicos convencionales y el perfil inmunohistoquimico.