J.-L. Vanoverschelde

P190 L’A769662, un nouvel activateur de l’AMPK capable d’augmenter la sensibilité cellulaire aux activateurs classiques tel que la metformine

Introduction L’AMPK est connue pour son role protecteur lors de troubles metaboliques tels que l’insulino-resistance. En effet, l’AMPK est consideree comme une issue du secours par sa capacite a stimuler le transport de glucose independamment de l’insuline. Les activateurs classiques de l’AMPK, tels que la metformine et la phenformine, sont aspecifiques et peuvent induire des effets secondaires. Un activateur specifique de l’AMPK, le compose A769662, a recemment ete decouvert. L’objectif de ce travail etait d’etudier les effets de l’A769662 sur le transport de glucose. Materiels et methodes Des cardiomyocytes adultes ont ete stimules avec l’A769662, seul ou en combinaison avec d’autres activateurs classiques de l’AMPK (metformine, phenformine et oligomycine). Le captage de glucose et l’etat de phosphorylation des elements de la signalisation ont ete mesure respectivement par detritiation du [2–3 H] glucose et par immunodetection. L’activite de l’AMPK a ete evaluee par l’incorporation de phosphate radioactif sur un peptide specifique. Resultats Contrairement aux activateurs classiques de l’AMPK, l’A769662 est incapable de stimuler le transport de glucose et ce, malgre son action activatrice sur la voie de l’AMPK. Cependant, l’A769662 potentialise les effets des activateurs classiques de l’AMPK. En effet, la combinaison de l’A769662 avec des activateurs comme la metformine induit une suractivation de la voie AMPK. Cette suractivation s’accompagne d’une surstimulation (de 300 %) du transport de glucose. Ces resultats contradictoires entre l’effet de l’A769662 seul et son effet potentialisateur peuvent etre expliques par le fait que l’A769662 n’active qu’une isoforme specifique de l’AMPK. Conclusion L’A769662, seul, est incapable de stimuler le transport de glucose. Cependant, par son effet de potentialisation, il permettrait de reduire les concentrations des activateurs classiques de l’AMPK necessaires a son activation et ainsi de reduire leurs effets secondaires potentiels.

P2028 Identification d’un senseur au glucose dans le tissu cardiaque : mise en évidence de l’isoforme SGLT3

Introduction L’hyperglycemie exerce des effets deleteres sur le myocarde suite a une activation de la NADPH oxydase (NOX2). L’activation de NOX2 ne necessite pas la metabolisation du glucose mais est le resultat du transport de glucose par un cotransporteur sodium-glucose ou SGLT. L’expression des isoformes de SGLT dans le coeur et plus particulierement dans le cardiomyocyte n’est pas decrite a ce jour. Le but de ce travail est de detecter l’expression des isoformes principales de SGLT dans le coeur et les cardiomyocytes isoles. Materiels et methodes L’expression genique et proteique des isoformes 1, 2 et 3 de SGLT a ete etudiee par RT-PCR et immunodetection sur des extraits de coeurs entiers et de cardiomyocytes isoles de rat adulte en culture primaire. Resultats L’ARNm de SGLT1 est detecte dans le coeur et dans les cardiomyocytes. Par immunodetection, la proteine SGLT1 est mise en evidence dans le coeur entier et les cardiomyocytes mais le niveau d’expression est beaucoup plus faible que dans des cellules intestinales. SGLT2 est exprime dans un extrait de cœur entier. Par contre, cette isoforme n’est pas detectee dans le cardiomyocyte isole. De maniere plus interessante, l’isoforme SGLT3b est detectee par RT-PCR dans le coeur entier et de maniere plus evidente encore, dans les cardiomyocytes. Une proteine de 55 kDa est detectee par l’anticorps antiSGLT3 humain dans les extraits de coeur et de cardiomyocytes. Conclusion Nous montrons pour la premiere fois l’expression de l’isoforme SGLT3b dans le coeur et surtout dans le cardiomyocyte. Nous confirmons la presence de SGLT1 dans le coeur. Par contre et contrairement a SGLT1 et SGLT3b, SGLT2 n’est pas exprime dans le cardiomyocyte. SGLT3b est considere comme un senseur au glucose et pourrait etre responsable d’une activation de la signalisation intracellulaire menant a l’activation de NOX2 en reponse a une hyperglycemie.